Kokie dažniausiai naudojami optinių mikroskopų stebėjimo metodai
Optinis mikroskopas yra optinis instrumentas, kuris naudoja šviesą kaip šviesos šaltinį, kad padidintų ir stebėtų mažas plika akimi nematomas struktūras* Ankstyvuosius mikroskopus 1604 m. pagamino optikai.
Per pastaruosius dvidešimt metų mokslininkai atrado, kad optiniai mikroskopai gali būti naudojami aptikti, sekti ir vaizduoti objektus, kurie yra mažesni nei pusė tradicinės matomos šviesos bangos ilgio arba keli šimtai nanometrų.
Dėl to, kad optiniai mikroskopai tradiciškai nebuvo naudojami nanoskalės tyrimui, jiems dažnai trūksta kalibravimo palyginimų su standartais, siekiant patikrinti, ar rezultatai yra teisingi ir gauti tikslią informaciją toje skalėje. Mikroskopai gali tiksliai ir nuosekliai nurodyti tą pačią atskirų molekulių ar nanodalelių padėtį. Tačiau tuo pat metu jis gali būti labai netikslus, nes mikroskopu identifikuoto objekto padėtis milijardo metro ribose iš tikrųjų gali būti viena milijoninė metro dalis, nes klaidų nėra.
Optiniai mikroskopai yra įprasti laboratoriniuose prietaisuose ir gali lengvai padidinti įvairius mėginius – nuo subtilių biologinių mėginių iki elektros ir mechaninės įrangos. Panašiai optiniai mikroskopai tampa vis galingesni ir ekonomiškesni, nes juose derinamos mokslinės išmaniųjų telefonų apšvietimo ir kamerų versijos.
Įprasti optinių mikroskopų stebėjimo metodai
Diferencialinių trukdžių (DIC) stebėjimo metodas
principu
Naudojant specialiai sukurtą prizmę, poliarizuota šviesa suskaidoma į vienodo intensyvumo ir vienas kitam statmenus pluoštus. Spinduliai prasiskverbia per objektą labai arti (mažesnė nei mikroskopo skiriamoji geba), todėl susidaro nedideli fazių skirtumai, suteikiantys vaizdui trimatį pojūtį.
charakteristika
Tai gali priversti apžiūrimą objektą sukurti trimatį pojūtį ir intuityviai stebėti poveikį. Nereikia specialaus objektyvo, kuris geriau suderinamas su fluorescencijos stebėjimu ir gali reguliuoti fono ir objektų spalvų pokyčius, kad būtų pasiekti idealūs rezultatai.
Tamsaus lauko stebėjimo metodas
Tamsus matymo laukas iš tikrųjų yra tamsus lauko apšvietimas. Jo charakteristikos skiriasi nuo ryškaus matymo lauko, kuriame jis tiesiogiai nestebi apšvietimo šviesos, o stebi atspindėtą arba išsklaidytą bandomojo objekto šviesą. Todėl matymo laukas yra tamsus fonas, o apžiūrimas objektas pateikia ryškų vaizdą.
Tamsaus matymo lauko principas pagrįstas optiniu Tindall reiškiniu, kai tiesioginiuose saulės spinduliuose žmogaus akis negali pastebėti smulkių dulkių, kurias sukelia stiprios šviesos difrakcija. Jei šviesa nukreipta į ją, atrodo, kad dalelių tūris didėja ir tampa matomos žmogaus akiai dėl šviesos atspindžio. Tamsaus lauko stebėjimui reikalingas specialus priedas yra tamsaus lauko kondensatorius. Jo savybė yra neleisti šviesos pluoštui pereiti per apžiūrimą objektą iš apačios į viršų, o keisti šviesos pluošto kelią, nukreipiant jį į apžiūrimą objektą, kad apšvietimo šviesa tiesiogiai nepatektų į objektyvo lęšį, ir naudoja ryškų vaizdą, susidarantį dėl atsispindėjusios arba išsklaidytos šviesos apžiūrimo objekto paviršiuje. Tamsaus lauko stebėjimo skiriamoji geba yra daug didesnė nei šviesaus lauko stebėjimo skiriamoji geba ir pasiekia 0.02-0.004 μM.
