Fluorescencinio mikroskopo struktūra ir pagrindiniai komponentai
(1) Šviesos šaltinis
Šiais laikais kaip šviesos šaltinis dažniausiai naudojama 200 W itin aukšto slėgio gyvsidabrio lempa. Jis pagamintas iš kvarcinio stiklo, kurio viduryje yra sferinė forma, o viduje užpildytas tam tikras gyvsidabrio kiekis. Veikimo metu dėl išlydžio tarp dviejų elektrodų gyvsidabris išgaruoja, o slėgis sferos viduje sparčiai didėja. Kai gyvsidabris visiškai išgaruoja, jis gali pasiekti 50-70 standartinį atmosferos slėgį, o tai paprastai trunka apie 5-15 minutes. Itin aukšto slėgio gyvsidabrio lempų liuminescencija yra išlydžio tarp elektrodų rezultatas, kuris nuolat disocijuoja ir sumažina gyvsidabrio molekules bei skleidžia fotonus. Skleidžia stiprią ultravioletinę ir mėlynai violetinę šviesą, kurios pakanka įvairioms fluorescencinėms medžiagoms sužadinti, todėl plačiai naudojamas fluorescenciniuose mikroskopuose.
Itin aukšto slėgio gyvsidabrio lempos taip pat išskiria daug šilumos energijos. Todėl lempos patalpoje turi būti geros šilumos išsklaidymo sąlygos, o darbo aplinkos temperatūra neturi būti per aukšta.
Nauja itin aukšto slėgio gyvsidabrio lempa nereikalauja aukštos įtampos, kad užsidegtų ankstyvoje naudojimo stadijoje. Po tam tikro naudojimo laiko jį reikia paleisti nuo aukštos įtampos (apie 15000V). Po paleidimo darbinė įtampa paprastai palaikoma 50-60V, o darbinė srovė yra apie 4 A. Vidutinė 200 W itin aukšto slėgio gyvsidabrio lempos eksploatavimo trukmė yra apie 200 valandų, kai ji naudojama 2 valandas kiekvieną kartą. Kuo trumpesnis veikimo laikas, tuo trumpesnis tarnavimo laikas. Vieną kartą naudojant tik 20 minučių, eksploatavimo trukmė sutrumpėja 50%. Todėl naudodami stenkitės kuo labiau sumažinti paleidimų skaičių. Naudojimo metu lemputės šviesos efektyvumas palaipsniui mažėja. Kai lemputė užgęsta, prieš paleidžiant iš naujo, reikia palaukti, kol atvės. Uždegus lemputę, jos nereikėtų iš karto išjungti, kad gyvsidabris neišgaruotų ir nepažeistų elektrodo. Paprastai reikia palaukti 15 minučių. Dėl didelio slėgio ir stiprios ultravioletinės spinduliuotės, kurią sukelia itin aukšto slėgio gyvsidabrio lempa, prieš uždegimą lemputę reikia įdėti į lempos kamerą, kad būtų išvengta akių sužalojimo ir sprogimo veikimo metu.
Itin aukšto slėgio gyvsidabrio lempos (100 W arba 200 W) šviesos šaltinio grandinė ir jos komponentai, įskaitant įtampos transformaciją, srovės slopinimą ir paleidimą. Lemputės patalpoje yra lemputės šviesos centro reguliavimo sistema, už lemputės sumontuotas aliuminiu dengtas įgaubtas atšvaitas, o priekyje – šviesą renkantis lęšis.
Vietos gamybos itin aukšto slėgio gyvsidabrio lempa GCQ-200 pasižymi geru našumu ir gali pakeisti importuotas lemputes, pvz., HBO-200, kurios vidutinė eksploatavimo trukmė viršija 200 valandų ir palyginti maža kaina.
Paprastas ir nešiojamas aukštos spalvinės temperatūros bromo volframo fluorescencinis šviesos šaltinio įrenginys, sukurtas Kinijoje, mažo tūrio, lengvo svorio, mažos galios, dvigubo kintamosios ir nuolatinės srovės naudojimo (su įmontuotu nuolatinės srovės maitinimo šaltiniu), lengvai nešiojamas, patogus naudoti , buvo reklamuojamas ir taikomas.
(2) Spalvų filtravimo sistema
Spalvų filtrų sistema yra svarbi fluorescencinio mikroskopo dalis, kurią sudaro sužadinimo filtro plokštė ir suspaudimo filtro plokštė. Filtro plokštės modelis dažnai skiriasi tarp gamintojų. Filtrų plokštės paprastai vadinamos pagal pagrindinį spalvos toną, pirmoji raidė reiškia spalvos toną, antra raidė – stiklą, o skaičius – modelio charakteristikas. Olympus mikroskopas
(3) Objektyvinis lęšis
Galima naudoti įvairius objektyvus, tačiau naudojant achromatinius objektyvus tinka fluorescencija, nes jų savaiminė fluorescencija ir pralaidumas (bangos ilgio diapazonas) yra ypač žemas. Dėl to, kad vaizdo fluorescencinis ryškumas mikroskopo regėjimo lauke yra tiesiogiai proporcingas objektyvo lęšio diafragmos santykio kvadratui ir atvirkščiai proporcingas jo padidinimui, siekiant pagerinti fluorescencinio vaizdo ryškumą, objektyvo lęšis turi būti naudojamas didesnis diafragmos santykis. Ypač esant dideliam padidinimui, jo poveikis yra labai reikšmingas. Todėl mėginiams, kurių fluorescencija yra nepakankama, reikia naudoti objektyvą su dideliu diafragmos dažniu, kartu su kuo žemesniu okuliaru (4 x, 5 x, 6,3 x ir kt.).
(4) Šviesą atspindintis veidrodis
Atspindintis atšvaito sluoksnis paprastai yra padengtas aliuminiu, nes aliuminis sugeria mažiau ultravioletinių ir matomų šviesų mėlynai violetinėje srityje, atspindintis daugiau nei 90%, o sidabras atspindi tik 70%; Paprastai naudojami plokšti atšvaitai.
(5) Prožektorių veidrodis
Koncentratorius, sukurtas ir pagamintas specialiai fluorescencinei mikroskopijai, pagamintas iš kvarcinio stiklo ar kito stiklo, praleidžiančio ultravioletinę šviesą. Yra dviejų tipų tamsaus lauko dėkliukai su skirtingu regėjimo lauku. Taip pat yra diferencinės fluorescencijos koncentratorius.
(6) Kritimo šviesos įtaisas
Naujo tipo krintančios šviesos įtaisas dėl filtro dangos savybių atspindi trumpesnio bangos ilgio dalis (ultravioletinę ir violetinę mėlyną) nuo šviesos šaltinio iki trukdžių spektrofotometro filtro. Kai filtras yra nukreiptas į šviesos šaltinį 45 laipsnių kampu. Kai jis pakreiptas, jis nukreipiamas vertikaliai į objektyvo lęšį ir nukreipiamas į bandinį per objektyvo lęšį, todėl bandinys sužadinamas. Šiuo metu objektyvo lęšis tiesiogiai veikia kaip kondensatorius. Tuo pačiu metu ilgosios filtro dalys (žalia, geltona, raudona ir kt.) yra skaidrios filtrui, todėl neatsispindi objektyvo kryptimi. Filtras veikia kaip sužadinimo filtro plokštė, o kadangi bandinio fluorescencija yra matomos šviesos ilgo bangos ilgio srityje, ją galima stebėti per filtrą ir pasiekti tikslą. Fluorescencinio vaizdo ryškumas didėja didinant ir yra stipresnis nei perduodamo šviesos šaltinio esant dideliam padidinimui. Be pralaidaus šviesos šaltinio funkcijos, jis labiau tinkamas tiesiogiai stebėti nepermatomus ir pusiau skaidrius mėginius, tokius kaip storos plokštelės, filtrų membranos, kolonijos, audinių kultūros mėginiai ir kt. Pastaraisiais metais dažnai naudojami naujai sukurti fluorescenciniai mikroskopai. naudokite krintančios šviesos prietaisus, žinomus kaip krintančios šviesos fluorescenciniai mikroskopai.
