Kiekvieno filtro vaidmuo fluorescencinėje mikroskopijoje
Svarbiausia fluorescencinės mikroskopijos problema yra filtrų derinys, o tiek sužadinimo filtras, tiek ekranuojantis filtras turi būti tinkami stebimam fluorescenciniam kūnui ir suderinti vienas su kitu. Tam tikriems tikslams, jei pasirenkant filtrą įvyko klaida, tai gali sukelti nesusipratimų ir net neteisingų rezultatų. Fluorescencinės mikroskopijos technologijos pasiekimai ir kokybiškų filtrų bei išradingų filtrų grupių naudojimas yra neatsiejami. Fluorescencinei mikroskopijai yra keletas filtrų tipų.
1. Šilumą sugeriantis filtras
Šilumą sugeriantis filtras yra būtinas filtras, kad šiluminė spinduliuotė šviesos šaltinio spektre nepažeistų optinių įrenginių grupės. Ankstyvieji pažangūs mikroskopai buvo aprūpinti būgno formos buteliais, kuriuose kaip šilumą sugeriantys įrenginiai galėjo laikyti distiliuotą vandenį. Šiuolaikiniai didelio masto tiriamieji mikroskopai turi stiklinius šilumą sugeriančius filtrus šviesos šaltinio šviesos dėžėse arba kamerose, kurios yra skaidrūs, šiek tiek geltoni stiklo lakštai. Leitz KG1 (2 mm) ir BG38 (4 mm) filtrai gali perduoti beveik visus ultravioletinės ir matomos šviesos spektrus, todėl jie yra filtrai, kurių šviesos srautas siekia iki 98%. Jis tik selektyviai sugeria infraraudonųjų spindulių fototerminės spinduliuotės linijas.
2. Sužadinimo filtras
Sužadinimo filtrai gali selektyviai sugerti ilgų bangų ilgio spektrines linijas ir perduoti tik ultravioletinę šviesą. Violetinės, mėlynos ir žalios šviesos filtrai yra sužadinimo filtrai. Zeiss, Reichert, Olympus B serija, G serija, BG serija, Shott UG serija, Opton H, G, BP serija, Leitz BP serija ir kiti filtrai yra visi sužadinimo filtrai.
3. Blokuojantis filtras
Blokuojantis filtras – tai filtras, selektyviai sugeriantis trumpų bangų ilgio spektrines linijas ir infraraudonąją spinduliuotę, todėl stebėtojas gali matyti bandomojo objekto skleidžiamą fluorescenciją, tuo pačiu apsaugodamas rageną nuo UV pažeidimų.
4. Spalvotas šviesos atskyrimo filtras
Spalvotos šviesos atskyrimo filtras yra filtras, kuris atspindi sužadinimo šviesą ant bandomojo objekto, todėl objektas skleidžia fluorescenciją, o tada perduoda fluorescenciją į okuliarą. Šio tipo filtrai gali būti naudojami tik krintančio spindulio koncentratoriuose, o naudojant šviesos fluorescencinę mikroskopiją spalvų atskyrimo nereikia.
5. Trikdžių filtras
Trikdžių filtras yra didelio našumo sužadinimo filtro tipas. Tai filtras, pagamintas sudėjus kelias plonas metalines plėveles tarp dviejų poliruoto stiklo lakštų. Kiekvienos plonos metalinės plėvelės lūžio rodiklis yra skirtingas, todėl ant kiekvienos metalinės plėvelės pakartotinai atsispindi apšvietimo šviesos šaltinio skirtingo bangos ilgio spektrinės linijos, dėl kurių kai kurie spektrinių linijų bangos ilgiai išnyksta dėl destruktyvių trukdžių, o kiti sustiprinami priediniai trukdžiai ir perduodami per. Dėl to gaunamas siauro perdavimo spektro filtras, kurio pusės smailės plotis yra tik 6–20 nm, o pralaidumas – 60–70%.
