Mikroskopo stiklelių paruošimo būdas
1. Tepinėlio metodas
Tepimo metodas – stiklelių paruošimo būdas, ant jų vienodai padengiant medžiagas.
Tepinėliams priskiriami{0}}vienaląsteliniai organizmai, smulkūs dumbliai, kraujas, bakterijų auginimo terpės, laisvi gyvūnų ir augalų audiniai, sėklidės, dulkiniai ir kt.
Tepdami reikia atkreipti dėmesį į:
(1) Stiklinė turi būti nuvalyta.
(2) Stiklinė stiklinė turi būti plokščia.
(3) Danga turi būti vienoda. Užlašinkite lašelį ant stiklinės stiklelio vidurio, dešinės pusės ir tolygiai paskirstykite jį pjaustymo peiliuku arba dantų krapštuku.
(4) Danga turi būti plona. Naudodami kitą stiklelį kaip stiklelį, švelniai stumkite iš dešinės į kairę išilgai stiklelio paviršiaus su užteptu skysčiu (kampas tarp dviejų stiklelių turi būti 30–45 laipsnių) ir užtepkite vienodą ploną sluoksnį.
(5) Ištaisyta. Jei reikalinga fiksacija, fiksavimui gali būti naudojami cheminiai fiksatoriai arba džiovinimo būdai (bakterijos).
(6) Dažymas. Bakterijos naudoja metileno mėlyną, o kraujas naudoja Wright dažymo tirpalą. Dažymo tirpalas turi padengti visą dangos paviršių.
(7) Nuplaukite. Sugerti arba išdžiovinti naudokite sugeriantį popierių.
(8) Užsandarinkite plėvelę. Ilgalaikis konservavimas naudojant Kanados medžių plėvelę.
2. Tabletės spaudimo būdas
Suspaudimo metodas – tai biologinių medžiagų pjaustymo būdas, dedant jas tarp stiklelio ir dangtelio, taikant tam tikrą spaudimą, kad išsklaidytų audinių ląsteles.
Bendras tablečių presavimo būdas:
(1) Medžiagos pasirinkimas. Norint stebėti ląstelių dalijimąsi, kaip medžiagas reikia pasirinkti šviežias audinių ląsteles, kurių ląstelės dalijasi intensyviai. Tokie kaip šaknies galiukas, stiebo galiuko meristema, kaulų čiulpų ląstelės, dulkinės (žiedadulkės motininės ląstelės). Spermos lizdai (spermatocitai) ir kt.
(2) Ištaisyta. Medžiagos fiksaciją galima nustatyti pagal poreikius, o mėginį reikia nedelsiant suspausti ir stebėti. Nebūtina atlikti atskiro fiksavimo apdorojimo (sinchroniškai su dažymu); Jei medžiaga nėra apžiūrima iš karto po mėginio paėmimo, ją galima fiksuoti fiksatoriumi (dažniausiai acto rūgšties alkoholio fiksatoriumi). Pritvirtinus 2-24 valandas (priklausomai nuo medžiagos), nuplaukite 95% etanoliu ir laikykite 70% etanolyje vėlesniam naudojimui.
(3) Atskyrimas. Medžiagas, kurių ląstelės nesunkiai išsklaido, reikia apdoroti hidrolizės atskyrimo tirpalu (pvz., 1N HCl arba druskos rūgšties sperma) 6–20 minučių. Po disociacijos prieš dažymą juos reikia nuplauti vandeniu.
(4) Dažymas. Yra daug rūšių dažų. Chromosomos dažniausiai dažomos acto rūgšties purpurinės spalvos dažymo tirpalu.
(5) Paspauskite planšetinį kompiuterį. Padėkite medžiagą ant stiklelio, įlašinkite lašelį vandens arba dažų tirpalo, uždenkite stiklelį dangteliu ir švelniai paspauskite nykščiu.
(6) Stebėkite. Po suspaudimo jį galima stebėti mikroskopu.
