Mėginių apdorojimo metodai ir elektroninės mikroskopijos žingsniai
Prieš naudojant transmisijos elektronų mikroskopą biologiniams mėginiams stebėti, mėginiai turi būti iš anksto apdoroti. Mokslininkai naudoja skirtingus apdorojimo metodus, kaip reikalauja skirtingi tyrimo reikalavimai.
Fiksavimas: siekiant kiek įmanoma labiau išsaugoti mėginį, mėginiui sukietinti naudojamas glutaraldehidas, o riebalams nudažyti – osminė rūgštis.
Šaltasis fiksavimas: mėginys greitai užšaldomas skystame etane, kad vanduo nesikristalizuotų ir vietoj to susidarytų amorfinis ledas. Taip išsaugoti pavyzdžiai turi mažiau žalos, tačiau vaizdo kontrastas labai mažas.
Dehidratacija: Vandeniui pakeisti naudokite etanolį ir acetoną.
Paminkštintas: paminkštinus pavyzdį galima padalinti.
Segmentavimas: mėginys supjaustomas plonais griežinėliais, naudojant deimantinį geležtę.
Dažymas: sunkieji atomai, tokie kaip švinas ar uranas, išsklaido elektronus stipriau nei lengvesni atomai, todėl gali būti naudojami kontrastui padidinti.
Prieš naudojant perdavimo elektronų mikroskopą metalams stebėti, mėginys turi būti
Virusai po elektroniniu mikroskopu
Supjaustant labai plonais griežinėliais (apie 0,1 mm) ir naudojant elektrolitinį poliravimą, kad metalas būtų toliau ploninamas, mėginio centre dažnai susidaro skylė, kurioje elektronai gali praeiti per labai ploną metalą. Metalai, kurių negalima poliruoti elektrolitiniu būdu, arba medžiagos, kurios nėra laidžios arba turi prastą laidumą, pavyzdžiui, silicis, paprastai skiedžiami mechaniškai ir apdorojami jonų smūgiu. Kad nelaidžiuose mėginiuose skenuojančiame elektroniniame mikroskope nesikauptų statinė elektra, jų paviršiai turi būti padengti laidžiu sluoksniu.
Kodėl elektroniniai mikroskopai turi didesnę skiriamąją gebą?
Kaip rodo pavadinimas, vadinamasis elektronų mikroskopas yra mikroskopas, kuris kaip apšvietimo šaltinį naudoja elektronų pluoštus. Kadangi veikiant išoriniam magnetiniam ar elektriniam laukui, elektronų pluoštas gali sulinkti, sudarydamas lūžio reiškinį, panašų į matomos šviesos, praeinančios per stiklą, reiškinį, mes galime panaudoti šį fizinį efektą, kad sukurtume elektronų pluošto „lęšį“. elektroninio mikroskopo kūrimas. Perdavimo elektronų mikroskopo (TEM) savybė yra ta, kad mes naudojame elektronų pluoštus, kurie praeina per mėginį į vaizdą, kuris skiriasi nuo skenuojančio elektroninio mikroskopo (Scanning Electron Microscope, SEM). Kadangi elektroninių bangų bangos ilgis yra daug mažesnis už matomos šviesos bangos ilgį (100kV elektronų bangų ilgis yra 0,0037 nm, o violetinės šviesos bangos ilgis yra 400 nm), pagal optinį teorija, galime tikėtis, kad elektroninių mikroskopų skiriamoji geba turėtų būti daug geresnė nei optinių mikroskopų. Tiesą sakant, šiuolaikinių elektroninių mikroskopų skiriamoji geba pasiekė 0,1 nm. Pasirenkamasis fizikos vadovėlis vyresniųjų klasių moksleiviams tai išsamiau paaiškinta (maža informacija apie fotoelektrinį efektą)
