Mikrobinio mikroskopo tiesioginio skaičiavimo metodas
Eksperimentiniai etapai (tiesioginio mikroskopinio skaičiavimo metodas)
1. Skiedimas
Tinkamai atskieskite alaus mielių suspensiją. Jei bakterijų tirpalas nekoncentruotas, jo skiesti nereikia.
2. Mikroskopinio tyrimo ir skaičiavimo kambarys
Prieš pridėdami mėginius, atlikite skaičiavimo lentos skaičiavimo kameros mikroskopinį tyrimą. Jei yra nešvarumų, prieš skaičiuojant jį reikia nuvalyti.
3. Pridėkite pavyzdžių
Uždenkite švarią ir sausą kraujo ląstelių skaičiavimo plokštelę dengiamuoju stiklu, o tada steriliu smulkia burna lašintuvu nulašinkite nedidelį lašelį (ne per daug) praskiesto mielių tirpalo nuo dengiamojo stiklo krašto. Leiskite bakterijų tirpalui patekti į skaičiavimo kamerą išilgai tarpo kapiliarų prasiskverbimo būdu. Paprastai skaičiavimo kamera gali būti užpildyta bakterijų tirpalu. Būkite atsargūs, kad nesusidarytų burbuliukų.
4. Mikroskopinis skaičiavimas
Pailsėję 5 minutes, padėkite kraujo ląstelių skaičiavimo lentą ant mikroskopo scenos, pirmiausia naudokite mažos galios mikroskopą, kad surastumėte skaičiavimo kambario vietą, o tada skaičiavimui perjunkite į didelės galios mikroskopą. Jei prieš skaičiuojant nustatoma, kad bakterinis tirpalas yra per tirštas arba per plonas, prieš skaičiuojant praskiedimą reikia dar kartą pakoreguoti. Bendras mėginio praskiedimo reikalavimas yra tas, kad vienoje mažoje ląstelėje turėtų būti maždaug 5-10 bakterijų kūnų. Skaičiavimui pasirinkite 5 langelius iš kiekvienos skaičiavimo patalpos (neprivaloma 4 kampų ir centrinių langelių). Grybiena, esanti tinklelio linijoje, paprastai skaičiuojama tik viršutinėje ir dešinėje eilutėse. Jei mielės išdygsta ir pumpuro dydis siekia pusę motininės ląstelės, atliekami du bakterijų skaičiavimai. Norint suskaičiuoti mėginį, bakterijų kiekis mėginyje turi būti apskaičiuojamas pagal vertes, gautas iš dviejų skaičiavimo kamerų.
5. Nuvalykite kraujo ląstelių skaičiavimo lentą
Po naudojimo nuplaukite kraujo ląstelių skaičiavimo lentą vandens stulpeliu ant vandens čiaupo. Skalbimui nenaudokite kietų daiktų. Po plovimo patys išdžiovinkite ore arba išdžiovinkite plaukų džiovintuvu. Mikroskopinis tyrimas, stebėkite, ar kiekvienoje mažoje ląstelėje nėra bakterijų kūnų ar kitų nuosėdų. Jei jis nėra švarus, jį reikia plauti kelis kartus, kol jis bus švarus.
