Įvadas į daugiafotoninės lazerinės skenuojančios mikroskopijos privalumus ir trūkumus
1. Sužadinimui naudojant raudoną arba infraraudonąją šviesą, šviesos sklaida yra nedidelė, o mažų dalelių sklaida yra atvirkščiai proporcinga ketvirtajai bangos ilgio galiai.
2. Daugiau išsibarsčiusių fotonų iš vaizdo skerspjūvio galima surinkti be skylučių.
3. Smeigtukas negali atskirti išsklaidytų fotonų, skleidžiamų iš defokusuotos srities ar židinio zonos, o signalo ir triukšmo santykis daugiafotoniniame vaizde giliuose sluoksniuose yra geras.
4. Ultravioletinę arba matomą šviesą, naudojamą vieno fotono sužadinimui, mėginys lengvai sugeria ir susilpnina, kol spindulys pasiekia židinio plokštumą, todėl sunku sužadinti gilius sluoksnius.
5. Kalbant apie stebėjimą biologiniu mikroskopu, pirmiausia reikia nepažeisti paties organizmo aktyvios būsenos ir palaikyti vandens tekėjimą, jonų koncentraciją, deguonį ir maistines medžiagas. Šviesos stebėjimo atveju tiek šilumos, tiek fotonų energija turi neviršyti apšvitinimo ir šviesos energijos, kad ląstelės nebūtų pažeistos.
6. Daugiafotoninė mikroskopija turi daug privalumų. Tokie kaip trimatė skiriamoji geba, įsiskverbimas į gylį, sklaidos efektyvumas, foninė šviesa, signalo ir triukšmo santykis, valdymas ir tt turi savybių, kurių ankstesni lazeriniai mikroskopai neturėjo arba negalėjo palyginti su jomis.
Daugiafotoninės lazerinės skenuojančios mikroskopijos trūkumai:
1. Jis gali atvaizduoti tik fluorescenciją.
2. Jei mėginyje yra chromoforų, kurie sugeria sužadinimo šviesą, mėginys gali būti termiškai pažeistas.
3. Raiška šiek tiek sumažinta. Nors jį galima pagerinti tuo pačiu metu naudojant konfokalines angas, signalas prarandamas.
4. Apriboti brangių itin greitų lazerių, daugiafotonų skenuojančių mikroskopų kaina yra gana didelė.
