Įvadas į daugiafotoninio lazerinio skenuojančio mikroskopo privalumus ir trūkumus
Daugiafotoninės lazerinės skenuojančios mikroskopijos privalumai:
1. Sužadintas raudonos arba infraraudonosios šviesos, šviesos sklaida yra nedidelė, o mažų dalelių sklaida yra atvirkščiai proporcinga ketvirtajai bangos ilgio galiai.
2. Daugiau išsibarsčiusių fotonų iš vaizdavimo skyriaus galima surinkti be skylučių.
3. Smeigtukas negali atskirti išsibarsčiusių fotonų, skleidžiamų iš nefokusuotos srities arba židinio zonos, o signalo ir triukšmo santykis atliekant kelių fotonų vaizdavimą giliuose sluoksniuose yra geras.
4. Ultravioletą arba matomą šviesą, naudojamą vieno fotono sužadinimui, mėginys lengvai sugeria ir susilpnina, kol pluoštas pasiekia židinio plokštumą, o gilius sluoksnius sužadinti nėra lengva.
5. Stebint biologinį mikroskopą, pirmiausia reikia nepažeisti aktyvios paties organizmo būsenos, palaikyti vandens, jonų koncentracijos, deguonies ir maistinių medžiagų cirkuliaciją. Šviesos stebėjimo atveju tiek šilumos, tiek fotonų energija turi neviršyti apšvitinimo kiekio ir šviesos energijos, kuri nepažeistų ląstelių.
6. Daugiafotoninė mikroskopija turi daug privalumų. Tokie kaip trimatė skiriamoji geba, gilus įsiskverbimas, sklaidos efektyvumas, foninė šviesa, signalo ir triukšmo santykis, valdymas ir t.t., visa tai turi savybių, kurių ankstesni lazeriniai mikroskopai neturėjo arba negalėjo pranokti.
Daugiafotoninės lazerinės skenuojančios mikroskopijos trūkumai:
1. Tik fluorescenciniam vaizdavimui.
2. Jei mėginyje yra chromoforų, kurie sugeria sužadinimo šviesą, mėginys gali būti termiškai pažeistas.
3. Raiška šiek tiek sumažinta. Nors jį galima pagerinti tuo pačiu metu naudojant konfokalinę diafragmą, signalas prarandamas.
4. Dėl brangių itin greitų lazerių apribojimų daugiafotoninio skenuojančio mikroskopo kaina yra gana didelė.
