Kaip perskaityti fluorescencinės mikroskopijos rezultatus naudojant tunelį apoptozei aptikti
1. Stebėdami rezultatus atkreipkite dėmesį į tris taškus, epiprojekcijos metodą, skiriamąją gebą ir filtro apdorojimą. Tiksliau:
Apšvietimo metodas dažniausiai yra episkopinis, tai yra, šviesos šaltinis projektuojamas ant mėginio per objektyvo lęšį;
Šviesos šaltinis yra ultravioletinė šviesa, bangos ilgis trumpesnis, o skiriamoji geba didesnė nei įprastų mikroskopų;
Yra du specialūs filtrai, esantis prieš šviesos šaltinį, skirtas matomai šviesai filtruoti, o esantis tarp okuliaro ir objektyvo yra naudojamas ultravioletiniams spinduliams filtruoti, siekiant apsaugoti žmogaus akis.
Antra, fluorescencinis mikroskopas, naudojamas apoptozei matuoti tuneliu, taip pat yra savotiškas optinis mikroskopas, pagrindinis skirtumas yra tas, kad abiejų sužadinimo bangos ilgiai yra skirtingi. Tai lemia skirtumą tarp fluorescencinio mikroskopo ir įprasto optinio mikroskopo struktūros ir naudojimo požiūriu. Fluorescencinė mikroskopija yra esminė imunofluorescencinės citochemijos priemonė. Jį sudaro pagrindiniai komponentai, tokie kaip šviesos šaltinis, filtro plokštelių sistema ir optinė sistema. Tai yra naudoti tam tikrą šviesos bangos ilgį bandiniui sužadinti, kad jis skleistų fluorescenciją, ir stebėti bandinio fluorescencinį vaizdą stiprinant objektyvo lęšį ir okuliaro sistemą.
3. Slopintos fluorescencijos filtro plokštelė apoptozei tunelyje matuoti Slopinamo filtro plokštės funkcija yra visiškai blokuoti sužadinimo šviesos praėjimą ir užtikrinti fluorescenciją atitinkamame bangos ilgių diapazone. Atitinkamai sužadinimo filtro plokštę, dažniausiai naudojamos trijų tipų presuotos filtro plokštės:
Ultravioletinės šviesos presavimo filtro plokštė: ji gali praleisti matomą šviesą ir blokuoti ultravioletinių spindulių prasiskverbimą. Galima derinti su UG-1 arba UG-5. Dažniausiai naudojamas GG-3K430 arba GG-6K460.
Violetinės mėlynos spalvos šviesos slopinimo filtro plokštė: gali praleisti šviesą, kurios bangos ilgis viršija 510 nm (nuo žalios iki raudonos), ir gali būti derinamas su BG-12. Paprastai naudojamas OG-4K510 arba OG-1K530.
Ultravioletinės šviesos spaudimo filtro plokštė: gali praleisti šviesą, kurios bangos ilgis viršija 460 nm (nuo mėlynos iki raudonos), gali būti derinamas su BG-3, dažniausiai naudojamas OG-11K470AK 490, K510.
