Kiekvieno filtro funkcijos fluorescenciniame mikroskope
Svarbiausia fluorescencinės mikroskopijos problema yra optinių filtrų derinys. Tiek sužadinimo filtras, tiek ekranuojantis filtras turi būti tinkami stebimai fluorescencinei medžiagai ir suderinti vienas su kitu. Kai kuriose konkrečiose programose, jei pasirenkant filtrus yra klaidų, tai gali sukelti nesusipratimų ir netgi neteisingų rezultatų. Fluorescencinės mikroskopijos technologijos pasiekimai neatsiejami nuo aukštos-kokybės filtrų ir sumaniai suderintų filtrų grupių. Fluorescencinei mikroskopijai yra keletas filtrų tipų.
1. Šilumą sugeriantis filtras
Šilumą sugeriantis filtras yra būtinas filtras, kad šiluminė spinduliuotė šviesos šaltinio spektre nepažeistų optinės sistemos. Ankstyvieji pažangūs mikroskopai buvo aprūpinti būgno formos buteliais, kuriuose kaip šilumą sugeriantys įrenginiai galėjo laikyti distiliuotą vandenį. Šiuolaikiniuose didelio masto-tyriminiuose mikroskopuose šviesos šaltinio šviesos dėžėse arba lempų kamerose yra įrengti stiklo šilumą sugeriantys filtrai, kurie yra skaidrūs ir šiek tiek geltoni stiklo lakštai. Leitz KG1 (2 mm) ir BG38 (4 mm) filtrai gali perduoti beveik visus ultravioletinės ir matomos šviesos spektrus, kurių šviesos pralaidumas siekia iki 98%. Jis tik selektyviai sugeria infraraudonąją fototerminę spinduliuotę.
2. Sužadinimo filtras
Sužadinimo filtrai gali selektyviai sugerti ilgų bangų ilgio spektrines linijas ir perduoti tik ultravioletinę šviesą. Violetinės, mėlynos ir žalios šviesos filtrai yra sužadinimo filtrai. Zeiss, Reichert, Olympus B serija, G serija, BG serija, Shott UG serija, Opton H, G, BP serija, Leitz BP serija ir kiti optiniai filtrai yra sužadinimo filtrai.
3. Blokuojantis filtras
Blokuojantis filtras yra filtras, kuris selektyviai sugeria trumpųjų bangų spektrines linijas ir infraraudonuosius spindulius, tuo pačiu leidžiant matyti ilgesnes bangas. Jo funkcija yra leisti stebėtojui matyti fluorescenciją, kurią sužadina tikrinamas objektas, kartu apsaugant stebėtojo rageną nuo UV pažeidimų.
4. Spalvų atskyrimo filtras
Spalvų atskyrimo filtras yra filtro veidrodis, kuris atspindi sužadinimo šviesą ant tikrinamo objekto, todėl objektas skleidžia fluorescenciją, o tada perduoda fluorescenciją į okuliarą. Šio tipo filtrai gali būti naudojami tik krintančios šviesos kondensatoriuje, o skleidžiamos šviesos fluorescenciniam mikroskopui spalvų atskyrimo nereikia.
5. Trikdžių filtras
Trikdžių filtras yra didelio{0}}našumo sužadinimo filtro tipas. Tai filtras, pagamintas sudėjus kelias plonas metalines plėveles tarp dviejų poliruoto stiklo lakštų. Kiekvienos plonos metalinės plėvelės lūžio rodiklis yra skirtingas, todėl ant kiekvienos metalinės plėvelės pakartotinai atsispindi įvairių apšvietimo šviesos šaltinio bangų ilgių spektrinės linijos. Kai kurios tam tikro bangos ilgio spektrinės linijos yra panaikinamos dėl destruktyvių trukdžių, o kitos sustiprinamos adityviaisiais trukdžiais ir perduodamos. Dėl to gaunamas siauro perdavimo spektro filtras, kurio smailės plotis yra tik 6–20 nm. Pralaidumas gali siekti 60–70%.
