Fluorescenciniai mikroskopai gali būti suskirstyti į du tipus pagal šviesos kelio principą:
1. Perdavimo fluorescencinis mikroskopas
Senesniuose fluorescenciniuose mikroskopuose sužadinimo šviesos šaltinis praeina per mėginio medžiagą per kondensatorių, kad sužadintų fluorescenciją. Privalumas yra tas, kad fluorescencija yra stipri esant mažam padidinimui, tačiau trūkumas yra tas, kad fluorescencija susilpnėja, kai padidinimas didėja. Taigi jis tinka tik didesnių bandinių medžiagų stebėjimui.
2.Epifluorescencinė mikroskopija
Sužadinimo šviesa krenta žemyn nuo objektyvo ant bandinio paviršiaus, ty tas pats objektyvas naudojamas kaip apšvietimo kondensatorius ir objektyvas fluorescencijai surinkti.
Prie optinio kelio, kuris yra 45o kampu su optine ašimi, reikia pridėti dichroinį pluošto skirstytuvą (dichroic veidrodį). Sužadinimo šviesa atsispindi objektyvo lęšyje ir sukoncentruojama į mėginį. Mėginio generuojama fluorescencija atsispindi objektyvo lęšio paviršiuje ir dangtelyje. Stiklinio stiklelio paviršiuje atsispindinti sužadinimo šviesa tuo pačiu metu patenka į objektyvo lęšį ir grįžta į dichroinį pluošto skirstytuvą, kad atskirtų sužadinimo šviesą ir fluorescenciją. Tada likusią sužadinimo šviesą sugeria blokuojantis filtras. Jei naudojate skirtingus sužadinimo filtrų / dviejų spalvų pluošto skirstytuvų / blokuojančių filtrų derinių įdėklus, galite patenkinti skirtingų fluorescencinių reakcijų produktų poreikius.
Šio tipo fluorescencinio mikroskopo pranašumas yra tas, kad matymo laukas yra tolygiai apšviestas, vaizdas yra aiškus ir kuo didesnis padidinimas, tuo stipresnė fluorescencija.
Kokios yra pagrindinės optinių mikroskopų kategorijos?
1. Paprastas optinis mikroskopas
Įprasti optiniai mikroskopai daugiausia susideda iš šių dalių: apšvietimo sistemos, kurią sudaro šviesos šaltinis ir kondensatorius; optinio didinimo sistema, kurią sudaro objektyvas ir okuliaras. Tai pati svarbiausia mikroskopo dalis ir sukurta siekiant išvengti pernelyg didelės sferinės aberacijos ir chromatinės aberacijos, tiek okuliaras, tiek objektyvo lęšis yra sudaryti iš sudėtingų lęšių grupių.
2. Lazerinis konfokalinis skenuojantis mikroskopas
Lazerinis konfokalinis skenuojantis mikroskopas skamba labai aukštos klasės ir sudėtingai. Tiesą sakant, jis tiesiog naudoja lazerį kaip nuskaitymo šviesos šaltinį, kad greitai nuskaitytų ir atvaizduotų objektus taškas po taško, linija po linijos ir paviršius po paviršiaus.
Remiantis trumpesniu lazerio spindulio bangos ilgiu, pats spindulys yra labai plonas, o tai lemia, kad konfokalinio lazerinio skenavimo mikroskopo skiriamoji geba yra maždaug tris kartus didesnė už įprastą optinį mikroskopą. Šio tipo mikroskopas naudojamas stebėti ląstelių morfologiją ir kiekybiškai analizuoti tarpląstelinius biocheminius komponentus ir matuoti ląstelių morfologiją.
3. Tamsiojo lauko mikroskopas
Tamsaus lauko mikroskopo kondensatoriaus centre yra šviesos plokštė, kuri neleidžia apšvietimo šviesai tiesiogiai patekti į objektyvo lęšį. Į objektyvo lęšį gali patekti tik bandinio atspindima ir išsklaidyta šviesa. Todėl matymo lauko fonas yra juodas, o objektų kraštai – šviesūs.
