Fluorescencinio mikroskopo mėginio paruošimo reikalavimai
(i) Skaidrės
Skaidrės storis turi būti nuo 0,8 iki 1,2 mm, per stori šlaitai, viena vertus, daugiau šviesos sugerties, kita vertus, negali sužadinti paimto mėginio šviesos. Skaidrė turi būti lygi, vienodo storio, be akivaizdžios autofluorescencijos. Kartais reikia naudoti kvarcinio stiklo skaidres.
ii) dengiamąjį stiklelį
Dengiamieji stiklai yra maždaug 0,17 mm storio ir lygūs. Siekiant sustiprinti sužadinimo šviesą, taip pat gali būti naudojamas trukdyti dengiamajam stikleliui, tai yra specialus paviršius, padengtas daugybe skirtingų bangos ilgių šviesos sluoksnių, atlieka skirtingą vaidmenį medžiagų (pvz., magnio fluorido) trukdžiuose. dangtelis, kuris gali padaryti fluorescenciją per sklandų ir atspindėti šviesos sužadinimą, šviesos patelės sužadinimo atspindys gali būti bandinio sužadinimas.
(C) pavyzdžiai
Audinių dalys ar kiti mėginiai negali būti per stori, pavyzdžiui, per stora sužadinimo šviesa dažniausiai sunaudojama apatinėje bandinio dalyje, o objektyvo lęšis tiesiogiai stebimas viršutinėje nepakankamo sužadinimo dalyje. Be to, ląstelių persidengimas arba užmaskuotos priemaišos, turinčios įtakos vertinimui.
(D) sandarinimo priemonė
Sandarinimo agentas, dažniausiai naudojamas glicerolis, turi būti be autofluorescencijos, bespalvis ir skaidrus, fluorescencijos ryškumas esant pH 8,5 ~ 9,5, kai ryškesnis, nėra lengva greitai išblukti. Todėl dažniausiai naudojamas glicerinas ir 0,5 mol/l pH9.0 ~ 9,5 karbonatinio buferio yra vienodas mišinio kiekis sandarikliui.
(E) veidrodinė alyva
Bendrasis tamsaus lauko fluorescencinis mikroskopas ir alyvos veidrodžio mėginių stebėjimas, turi būti naudojama veidrodinė alyva, * gerai naudoti specialią nefluorescencinę veidrodinę alyvą, taip pat galima naudoti vietoje aukščiau nurodyto glicerolio, taip pat galima naudoti skystą parafiną, tačiau lūžio rodiklis yra mažesnis , vaizdo kokybė šiek tiek paveikiama.
