Daugiafotoninės lazerinės skenavimo mikroskopijos pranašumų padidinimas
Lazerinė skenavimo daugiafotoninė mikroskopija yra didelis patobulinimas, palyginti su optine mikroskopija. Jis gali stebėti gilią gyvų ląstelių struktūrą, fiksuotas ląsteles ir audinius, taip pat gauti aiškias ir ryškias daugiasluoksnes Z plokštumos struktūras, ty optines pjūvius, iš kurių gali sukurti trimatę kietą bandinio struktūrą. Konfokalinėje mikroskopijoje naudojamas lazerinis šviesos šaltinis, kuris po išsiplėtimo užpildo visą objektyvo lęšio užpakalinę židinio plokštumą, o tada praeina pro objektyvo lęšių sistemą, kad susilietų į labai mažą tašką bandinio židinio plokštumoje. Priklausomai nuo objektyvo objektyvo skaitmeninės diafragmos, ryškiausios apšvietimo vietos skersmuo yra apie 0,25 ~ 0,8 μm, o gylis yra apie 0,5 ~ 1,5 μm . Konfokalinės dėmės dydis priklauso nuo mikroskopo konstrukcijos, lazerio bangos ilgio, objektyvo lęšio charakteristikų, nuskaitymo įrenginio būsenos nustatymų ir mėginio savybių. Lauko mikroskopo apšvietimo diapazonas ir apšvietimo gylis yra dideli, o konfokalinio mikroskopo apšvietimas sutelktas tiksliai fokusuojant židinio plokštumą. Pagrindinis konfokalinės mikroskopijos privalumas yra tas, kad ja galima tiksliai optiškai atskirti storus fluorescencinius mėginius (kurie gali siekti 50 μm ar daugiau), o griežinėlių storis yra apie 0,5–1,5 μm. Serijinius optinių pjūvių vaizdus galima gauti judinant bandinį aukštyn ir žemyn, naudojant sudėtingą mikroskopo Z ašies žingsninį variklį. Vaizdo informacijos rinkimas valdomas tikslioje plokštumoje, netrukdant signalams, skleidžiamiems iš kitų bandinio vietų. Pašalinus fono fluorescencijos įtaką ir padidinus signalo ir triukšmo santykį, konfokalinių vaizdų kontrastas ir skiriamoji geba žymiai pagerėja, palyginti su tradiciniais lauko apšviestais fluorescenciniais vaizdais. Daugelyje egzempliorių daug sudėtingų struktūrinių komponentų yra susipynę, kad sudarytų sudėtingas sistemas, tačiau kai tik bus surinkta pakankamai optinių sekcijų, galime jas atkurti trimis matmenimis naudodami programinę įrangą. Šis eksperimentinis metodas buvo plačiai naudojamas biologiniuose tyrimuose, siekiant išsiaiškinti sudėtingus struktūrinius ir funkcinius ryšius tarp ląstelių ar audinių.
