Lazerinio skenavimo daugiafotoninės mikroskopijos pranašumų didinimas
Lazerinė skenavimo daugiafotoninė mikroskopija yra didelis patobulinimas, palyginti su optine mikroskopija. Jis gali stebėti gilią gyvų ląstelių struktūrą, fiksuotas ląsteles ir audinius, taip pat gauti aiškias ir ryškias daugiasluoksnes Z plokštumos struktūras, ty optines pjūvius, iš kurių gali sukurti trimatę kietą bandinio struktūrą. Konfokalinėje mikroskopijoje naudojamas lazerinis šviesos šaltinis, kuris po išsiplėtimo užpildo visą objektyvo lęšio užpakalinę židinio plokštumą, o tada praeina pro objektyvo lęšių sistemą, kad susilietų į labai mažą tašką bandinio židinio plokštumoje. Priklausomai nuo objektyvo objektyvo skaitmeninės diafragmos, ryškiausio apšvietimo taško skersmuo yra apie 0,25 ~ 0,8 μm, o gylis yra apie 0,5 ~ 1,5 μm . Konfokalinės dėmės dydis priklauso nuo mikroskopo konstrukcijos, lazerio bangos ilgio, objektyvo lęšio charakteristikų, nuskaitymo įrenginio būsenos nustatymų ir mėginio savybių. Lauko mikroskopija turi didelį apšvietimo diapazoną ir gylį, o konfokalinė mikroskopija turi fokusuotą apšvietimą, sutelktą į židinio tašką židinio plokštumoje. Pagrindinis konfokalinės mikroskopijos pranašumas yra tas, kad ja galima tiksliai optiškai atskirti storus fluorescencinius mėginius (kurie gali siekti 50 μm ar daugiau), o pjūvių storis yra apie 0,5–1,5 μm. Perkeliant mėginį aukštyn ir žemyn, naudojant mikroskopo Z ašies žingsninį variklį, galima gauti optinių pjūvių vaizdų seriją. Vaizdo informacijos gavimas yra valdomas plokštumoje ir jam netrukdys signalai, skleidžiami iš kitų bandinio vietų. Pašalinus fono fluorescencijos įtaką ir padidinus signalo ir triukšmo santykį, konfokalinių vaizdų kontrastas ir skiriamoji geba žymiai pagerėja, palyginti su tradiciniais lauko apšviestais fluorescenciniais vaizdais. Daugelyje egzempliorių daug sudėtingų struktūrinių komponentų yra susipynę, kad sudarytų sudėtingas sistemas, tačiau kai tik bus surinkta pakankamai optinių sekcijų, galime jas atkurti trimis matmenimis naudodami programinę įrangą. Šis eksperimentinis metodas buvo plačiai naudojamas biologiniuose tyrimuose, siekiant išsiaiškinti sudėtingus struktūrinius ir funkcinius ryšius tarp ląstelių ar audinių.
