Šviesos mikroskopo vaizdo optinio kelio sistemos reguliavimas ir mikroskopinio tyrimo metmenys
Vaizdo gavimo optinio kelio sistemos ir mikroskopinio tyrimo kontūro reguliavimas
Mikroskopo vaizdinės optinės sistemos reguliavimas atliekamas pagal skirtingų mikroskopijos technikų poreikius. Vadinamoji mikroskopija, trumpai tariant, yra apšvietimo metodas, naudojamas stebint mėginį per mikroskopą, ir technika bei metodas, leidžiantis gauti geresnį mėginio suformuoto vaizdo kontrastą. Toliau trumpai aprašomas mikroskopijos brandinimas keliais metodais ir atitinkamas mikroskopinio vaizdo optinės sistemos reguliavimo metodas.
1. Ryškus perdavimo laukas:
Tai tradiciškiausias ir labiausiai paplitęs taikymo būdas nuo mikroskopo išradimo. Pagrindiniai komponentai: a. Objektyvinis lęšis: bet koks objektyvas gali būti naudojamas ryškiam laukui stebėti; b. Taškinis taikiklis: galima naudoti visų rūšių taikiklius, pageidautina su diafragma su diafragma. Reguliavimo metodas: sureguliavus pirmiau minėto mikroskopo Kuhler apšvietimo sistemą, galima taikyti šviesaus lauko metodą. Taikymo sritis: visos nudažytos audinių pjūviai, kraujo tepinėliai ir kt. Atsargumo priemonės: a. Naudojant šviesaus lauko stebėjimo metodą, Kuhler apšvietimo sistema turi būti sureguliuota; b. Regėjimo lauko diafragma neturėtų būti atidaryta savavališkai, o kondensatoriaus veidrodžio priekinis lęšis turi būti nustatytas faktiškai išorėje ir atitinkamai į optinį kelią, kai naudojami 10 ×, mažesni nei 10 × ir didesni nei 10 objektyvai. ×; c. Kondensatoriaus veidrodžio diafragmos diafragma neturėtų būti naudojama regėjimo lauko ryškumui reguliuoti, o kondensatoriaus veidrodžio aukštis neturėtų būti reguliuojamas be atskyrimo, kitaip bus sumažinta mikroskopo skiriamoji geba ir sumažėjusi nudažyto audinio skiriamoji geba. bus sugadinta. mikroskopo skiriamoji geba ir pažeidimai pritaikyti Kuhler apšvietimo sistemai; d. mikrografijose, kiekvieną kartą keičiant objektyvo padidinimo naudojimą, turite sureguliuoti kondensatoriaus objektyvo diafragmos diafragmą taip, kad jos dydis būtų tiksliai lygus 2/3 skaitinei objektyvo diafragmai.
2. Perduodamos šviesos fazės kontrasto metodas:
Tai modernus kontrasto stiprinimo metodo tyrimas mikroskopu. Pagrindiniai komponentai: fazinio kontrasto objektyvas, ryškus matymo laukas ir fazinio kontrasto daugiafunkcis taškas, fokusavimo teleskopas, žali filtrai.
Koregavimo būdai:
a. Remdamiesi Kuhler apšvietimo sistemos reguliavimu, aiškiai sufokusuokite mėginį naudodami šviesaus lauko metodą
b. Pasukite stebėjimo sritį į Ph1, kad sulygiuotumėte ratuko skalės padėtį, pasirinkite 10 × fazės kontrasto objektyvą ir pakeiskite permatomą mėginį, kurį norite stebėti.
c. Atjunkite vieną iš okuliarų, pakeiskite jį centre esančiu teleskopu ir sufokusuokite du matymo lauke esančius fazinio kontrasto žiedus (objektyvo objektyvo juodos fazės kontrasto žiedą ir kondensatoriaus lęšio šviesos pralaidumo fazės kontrasto žiedą).
d. Du fazinio kontrasto žiedai matymo lauke nebūtinai gali sutapti, sureguliuokite du reguliavimo įtaisus taške (sureguliuokite fazinio kontrasto žiedo reguliavimo svirties kairę ir dešinę padėtį ir sureguliuokite trinties rankenėlės priekinę ir galinę padėtį) , kad šviesos perdavimo žiedas priekyje ir gale į dešinę ir į kairę sutaptų su juodu žiedu
e. Sureguliavę, grįžkite į okuliarą, kad galėtumėte stebėti, ir paspauskite žalią filtrą į optinį kelią, kad pamatytumėte mėginio fazinio kontrasto vaizdą.
f. Kai stebėjimui naudojami 20× ir 40× objektyvai, taškinį lęšį reikia nustatyti į Ph2 padėtį, o naudojant 100 objektyvų – į Ph3 padėtį.
Taikymo sritis: tinka stebėti skaidrius, nedažytus ar nedažančius mėginius, tokius kaip visų rūšių ląstelės, gyvi audiniai, nedažytos arba nedažytos audinių dalys, vandens organizmai ir pan.
3. Diferencialinių trukdžių fazės kontrasto metodas:
Siekiant įveikti fazinio kontrasto metodą, stebint pavyzdžio detales aplink vaizdą kartu su aureole, bus užmaskuotos detalės, kurios turėjo būti matomos, taip pat mėginiams ar audinių pjūviams reikalingas gana plonas storis, iš esmės, būti storesnis nei 10 m ir kiti apribojimai, dviejų spindulių trukdžių principo panaudojimas subdiferencialinių trukdžių fazės kontrasto metodui sukurti.
Koregavimo būdai:
a. DIC metodas turi būti koreguojamas remiantis tuo, kad Kulemin sistema jau buvo pakoreguota
b. Naudodami 10 × objektyvą, nustatykite objektyvo, kuris aiškiai mato pavyzdį esant ryškiam matymo laukui, fokusavimo padėtį.
c. Įdėkite poliarizatorių į apšvietimo kelią, atkreipdami dėmesį, kad jis turėtų būti nukreiptas rytų-vakarų kryptimi.
d. Pasukite kondensatoriaus ratuką į padėtį, atitinkančią 10 × objektyvo naudojimą, ty DIC 0.3-0.4.
e. Įstatykite 10 × objektyvo DIC slankiklį objektyvo objektyvo gale arba ant objektyvo keitiklio.
f. Įkiškite analizatorių į vaizdo gavimo optinį kelią ir atkreipkite dėmesį, kad jo orientacija turi būti pietų-šiaurės kryptimi.
g. Pakeiskite permatomą mėginį, kurį reikia stebėti, įjunkite šviesos šaltinį, kad mėginys būtų aiškiai sufokusuotas.
h. Sureguliuokite DIC įdėklą taip, kad diferencinio trukdžių kontrasto vaizdas pasiektų geriausią efektą, ty ryškiausią reljefo efektą.
i. Tuo pačiu metu sureguliuokite kondensatoriaus veidrodžio diafragmos diafragmą, kad kontrasto efektas taip pat būtų optimalus.
j. Tada patikslinkite mėginio detales, kad pamatytumėte mėginio struktūrą skirtingais lygiais.
k. Jei įterpiama papildoma spalva (pirmos eilės raudona sulėtinimo plokštelė) ir tuo pačiu metu sureguliuojamas DIC įdėklas, regėjimo lauke matomos nuolat kintančios ryškios spalvos: raudona, oranžinė, geltona, žalia, mėlyna, violetinė, rožinė, rausvai violetinė ir aukso geltona. Taikymo sritis: skaidrios arba nedažomos audinių dalys, storis iki maždaug 100 m, gyvi audiniai ir gyvos ląstelės kultūroje, maži gyvi organizmai ir pan.
