Kuo skiriasi atvirkštinė fluorescencinė mikroskopija ir lazerinė konfokalinė mikroskopija?
Lazerinis konfokalinis mikroskopas – tai stebėjimo, analizės ir išvesties sistemų rinkinys, naudojant lazerį kaip šviesos šaltinį, konjuguoto fokusavimo principą ir įrenginį tradicinio optinio mikroskopo pagrindu bei stebimo objekto skaitmeninį vaizdo apdorojimą kompiuteriu. Pagrindinės sistemos apima lazerinius šviesos šaltinius, automatinius mikroskopus, skenavimo modulius (įskaitant konfokalinius optinio kelio kanalus ir skylutes, nuskaitymo veidrodžius, detektorius), skaitmeninius signalų procesorius, kompiuterius ir vaizdo išvesties įrenginius (ekranus, spalvotus spausdintuvus). Naudojant lazerinį skenuojantį konfokalinį mikroskopą, galima atlikti stebimo mėginio tomografiją ir vaizdavimą. Todėl galima stebėti ir analizuoti trimatę ląstelių erdvinę struktūrą nepažeidžiant.
Tuo pačiu metu lazerinė skenavimo konfokalinė mikroskopija taip pat yra galingas įrankis dinamiškam gyvų ląstelių stebėjimui, daugybiniam imunofluorescenciniam ženklinimui ir jonų fluorescenciniam ženklinimui. Jis tiksliai analizuoja spektro esmę ir atskiria signalus iš skirtingų etikečių, kurių emisijos spektrai labai persidengia.
Svarbiausias dalykas yra tai, kad kelių spalvų fluorescencinis dažymas gali visiškai pašalinti fluorescencijos skersinio pokalbio įtaką, tuo pačiu sumažinant mėginio fluorescencinio signalo praradimą. Tai yra dalykai, kurių įprasti veidrodžiai negali pasiekti.
Trys skirtumai
1. Fluorescencinis mikroskopas: Fluorescencinis mikroskopas yra pagrindinė imunofluorescencinės citochemijos priemonė. Jį sudaro pagrindiniai komponentai, tokie kaip šviesos šaltinis, filtro plokštelių sistema ir optinė sistema. Tai yra tam tikro šviesos bangos ilgio naudojimas bandiniui sužadinti ir fluorescencijai skleisti, ir bandinio fluorescencinio vaizdo stebėjimas naudojant objektyvo ir okuliaro sistemos stiprinimą.
2. Lazerinė konfokalinė mikroskopija: Lazerinės skenuojančios konfokalinės mikroskopijos technologija buvo naudojama tiriant ląstelių morfologijos lokalizaciją, trimatę struktūrinę rekombinaciją, dinaminius kaitos procesus ir suteikia praktinių tyrimo metodų, tokių kaip kiekybinis fluorescencijos matavimas ir kiekybinė vaizdo analizė. Kartu su kitomis susijusiomis biotechnologijomis jis buvo plačiai taikomas molekulinės ląstelių biologijos srityse, tokiose kaip morfologija, fiziologija, imunologija, genetika ir kt.
