Mikroskopo skiriamąją gebą lemia įvairios optinės sistemos sąlygos
1, skaitmeninė diafragma, taip pat žinoma kaip veidrodžio burnos greitis (arba atsidarymo greitis), sutrumpintai NA, objektyvo lęšyje ir koncentratoriuje yra pažymėta jų skaitine diafragma, skaitmeninė diafragma yra pagrindinis objektyvo lęšio ir koncentratoriaus parametras, bet ir svarbus jų veiklos rodiklis. Skaitmeninė diafragma ir mikroskopo veikimas turi glaudų ryšį su mikroskopo skiriamoji geba yra tiesiogiai proporcinga židinio gyliui, yra atvirkščiai proporcinga kvadratinei šaknis iš veidrodžio ryškumo yra tiesiogiai proporcinga. Skaitinė diafragma gali būti išreikšta tokia formule: NA=n.sin 2 čia: n - objektyvo lęšis ir bandinys tarp terpės kritulių greičio - objektyvo lęšis veidrodžio burnos kampu Vadinamasis veidrodis burnos kampas yra optinė ašis nuo objektyvo objekto taško iš objektyvo lęšio skleidžiamos šviesos ir objektyvo lęšio prieš objektyvą, kurio efektyvusis skersmuo lapo kampo krašto, žr. {{6 pav. }}. Veidrodžio burnos kampas visada yra mažesnis nei 18{{10}} laipsnių. Kadangi oro lūžio rodiklis yra 1, todėl sauso objektyvo lęšio skaitmeninė diafragma visada yra mažesnė už 1, paprastai 0.{11}}.95; aliejuje panardintas objektyvas, pvz., kedro aliejus (lūžio rodiklis 1,515), panardintas, skaitmeninė diafragma gali būti artima 1,5 Nors teorinė skaitmeninės diafragmos riba yra lygi naudojamos panardintos terpės lūžio rodikliui, tačiau praktiškai nuo objektyvo gamybos technologijos perspektyvos, šios ribos pasiekti neįmanoma. Praktiškai šios ribos neįmanoma pasiekti naudojant lęšių gamybos technologiją. Apskritai didelė alyvos imersinio objektyvo skaitmeninė diafragma yra 1,4 praktinėse ribose. Įvairių terpių lūžio rodikliai yra tokie: orui 1,0, vandeniui 1,33, stiklui 1,5, glicerinui 1,47, kedro aliejui 1,52.
2, skiriamąją gebą D galima išreikšti tokia formule: D=λ/2N.A. Matomos šviesos bangos ilgis yra 0.4-0,7 mikrono, vidutinis bangos ilgis yra 0,55 mikronai. Jei objektyvo skaitmeninė diafragma yra 0,65, D {{10}},55 mikrono / 2 × 0.65=0,42 mikrono. Tai reiškia, kad bandinį galima stebėti, jei jis yra didesnis nei 0,42 mikrono, bet negali būti matomas, jei jis mažesnis nei 0,42 mikrono. Kai naudojamas objektyvas, kurio skaitmeninė diafragma yra 1,25, D=2,20 mikronų. Jei stebimo objekto ilgis yra didesnis už šią reikšmę, jis gali būti matomas. Matyti, kad kuo mažesnė D reikšmė, tuo didesnė skiriamoji geba ir aiškesnis objektas. Pagal aukščiau pateiktą formulę galite: (1) sumažinti bangos ilgį; (2) padidinti lūžio rodiklį; (3) padidinkite veidrodžio kampą, kad pagerintumėte skiriamąją gebą. Ultravioletinė šviesa kaip mikroskopų ir elektroninių mikroskopų šviesos šaltinis yra trumpų šviesos bangų naudojimas, siekiant pagerinti skiriamąją gebą, norint pamatyti mažesnius objektus. Objektyvo lęšio skiriamoji geba yra glaudžiai susijusi su tuo, ar vaizdas yra aiškus. Okuliarai neturi šios galios. Okuliaras tik padidina objektyvo sukurtą vaizdą.
3, padidinimas: mikroskopas padidina objektą, pirmiausia per objektyvą * antrasis vaizdo padidinimas, okuliaras aiškaus matymo atstumu, kurį sukelia antrasis vaizdo padidinimas. Didinimas yra vaizdo dydžio ir pradinio objekto dydžio santykis. Todėl mikroskopo padidinimas (V) yra lygus gaminio objektyvo (V1) ir okuliaro padidinimui (V2), tai yra: V=V1 × V2 Skaičiavimo metodo palyginimas, galima gauti iš šios formulės M=△ × D F1 F2 F1=Objektyvo židinio nuotolis, F2=Okuliaro židinio nuotolis △=Optinio vamzdelio ilgis , D=regėjimo atstumas (= 250 mm) △=objektyvo padidinimas, D=okuliaro padidinimas M=mikroskopo didinimas F1 F2 Nustatyti △=160 mm F1=4 mm D=250 mm F2=150 mm, tada M=△ × D=160 × {{25} } × 16. 7=668 kartus F1 F2 4 15
4, fokusavimo gylis: stebint mėginį mikroskopu, objektas yra aiškus, kai židinys yra tam tikroje vaizdo plokštumoje, kuri yra tikslinė plokštuma. Matymo lauke, be tikslinės plokštumos, taip pat galite matyti neryškius objektus virš ir žemiau tikslinės plokštumos, o atstumas tarp šių dviejų paviršių vadinamas fokusavimo gyliu. Objektyvo lęšio lauko gylis ir skaitmeninė diafragma bei padidinimas yra atvirkščiai proporcingi, tai yra, kuo didesnė skaitmeninė diafragma ir padidinimas, tuo mažesnis lauko gylis. Todėl alyvos veidrodžio reguliavimas nei mažo didinimo veidrodžio koregavimas turi būti atsargesnis, kitaip lengva padaryti, kad objektas paslystų ir jo negalima rasti.
