Fluorescencinio mikroskopo patarimai ir gudrybės
(i) Skaidrės
Skaidrės storis turėtų būti nuo 0,8 iki 1,2 mm, per stori šlaitai, viena vertus, daugiau šviesos sugerties, kita vertus, negali sužadinti paimto mėginio šviesos. Skaidrė turi būti lygi, vienodo storio, be akivaizdžios autofluorescencijos. Kartais prireikia kvarcinio stiklo stiklelių.
ii) dangteliai
Dengiamasis stiklelio storis apie 0,17 mm, švarus. Siekiant sustiprinti sužadinimo šviesą, taip pat gali būti naudojamas trukdyti dengiamajam stikleliui, kuris yra specialus paviršius, padengtas daugybe skirtingų bangos ilgių šviesos sluoksnių, vaidina skirtingą vaidmenį medžiagų (pvz., magnio fluorido) trukdžiuose. dengiamąjį stiklelį, kuris gali sukelti fluorescenciją per sklandų ir atspindintį šviesos sužadinimą, atspindėtas šviesos sužadinimas gali būti pavyzdžio moters sužadinimas.
iii) pavyzdžiai
Audinių dalys ar kiti mėginiai negali būti per stori, pavyzdžiui, per stora sužadinimo šviesa dažniausiai sunaudojama apatinėje bandinio dalyje, o objektyvo lęšis tiesiogiai stebimas viršutinėje nepakankamo sužadinimo dalyje. Be to, ląstelių persidengimas arba priemaišų maskavimas, turintis įtakos vertinimui.
(D) sandarinimo priemonė
Sandarinimo medžiaga dažniausiai naudojamas glicerolis, turi būti be autofluorescencijos, bespalvis ir skaidrus, fluorescencijos ryškumas esant pH 8,5 ~ 9,5 yra ryškesnis, nesunku greitai išnykti. Todėl dažniausiai naudojamas glicerinas ir 0.5mol/lpH9.0 ~ 9,5 karbonatinio buferio yra vienodas mišinio kiekis sandarinimui.
(E) veidrodžio alyva
Bendrasis tamsaus lauko fluorescencinis mikroskopas ir aliejinių veidrodžių mėginių stebėjimas, turi būti naudojama veidrodinė alyva, pageidautina naudoti specialią nefluorescencinę veidrodinę alyvą, taip pat galima naudoti vietoje aukščiau minėto glicerolio, taip pat galima naudoti skystą parafiną, tačiau lūžio rodiklis mažesnis, šiek tiek paveikiantis vaizdo kokybę.
