Kuo skiriasi fluorescencinis mikroskopas ir apverstasis mikroskopas?
Mikroskopas yra svarbus ląstelių kultūros ir susijusių darinių eksperimentų instrumentas. Šiuo metu rinkoje yra įvairių tipų mikroskopų. Išsirinkti poreikius atitinkantį ir tinkamą mikroskopą – iššūkis. Toliau pateikiami apverstų mikroskopų ir fluorescencinių mikroskopų principai, kad galėtumėte lengvai pasirinkti.
Apverstojo mikroskopo sudėtis yra tokia pati kaip ir įprasto mikroskopo, jį daugiausia sudaro trys dalys: mechaninė dalis, apšvietimo dalis ir optinė dalis.
Apverstojo mikroskopo sudėtis yra tokia pati kaip ir įprasto vertikaliojo mikroskopo, išskyrus tai, kad objektyvo lęšis ir apšvietimo sistema yra atvirkščiai – pirmasis yra po scena, o antrasis – virš scenos.
Ši struktūra leidžia žymiai padidinti efektyvų atstumą tarp apšvietimo koncentravimo sistemos ir scenos, o tai patogu dėti storesnius objektus, kuriuos reikia stebėti, pavyzdžiui, Petri lėkštelės ir ląstelių kultūros kolbos (žinoma, stiklinės stikleliai taip pat priimtini). Darbinis atstumas tarp jų neturi būti labai didelis.
Apverstasis mikroskopas naudojamas mikroorganizmų, ląstelių, bakterijų, audinių kultūrų, suspensijų, nuosėdų ir kt. stebėjimui medicinos ir sveikatos padaliniuose, kolegijose ir universitetuose bei mokslinių tyrimų institutuose. Jis gali nuolat stebėti ląstelių ir bakterijų dauginimosi ir dalijimosi procesą auginimo terpėje ir gali fotografuoti bet kokią šio proceso formą.
Jis plačiai naudojamas citologijos, parazitologijos, onkologijos, imunologijos, genų inžinerijos, pramoninės mikrobiologijos, botanikos ir kitose srityse.
Fluorescencinė mikroskopija naudojama tiriant cheminių medžiagų absorbciją, transportavimą, pasiskirstymą ir lokalizaciją ląstelėse.
Tikrinamam objektui yra du fluorescencijos generavimo būdai: autofluorescencija, kuri skleidžia fluorescenciją iš karto po ultravioletinių spindulių apšvitinimo; antrinė fluorescencija, kuri gali skleisti fluorescenciją po to, kai stebimas objektas yra apdorojamas fluorescenciniais dažais ir apšvitinamas ultravioletine šviesa.
Kai kurios ląstelėse esančios medžiagos, pavyzdžiui, chlorofilas, po ultravioletinių spindulių apšvitinimo sukelia autofluorescenciją; kai kurios medžiagos negali savaime fluorescuoti, tačiau nudažytos fluorescenciniais dažais arba fluorescuojančiais antikūnais, po ultravioletinių spindulių apšvitinimo jos taip pat gali skleisti antrinę fluorescenciją.
Fluorescencinis mikroskopas naudoja didelio šviesos efektyvumo taškinį šviesos šaltinį ir skleidžia tam tikro bangos ilgio šviesą (ultravioletinė šviesa 365 nm arba violetinė mėlyna šviesa 420 nm) per spalvų filtrų sistemą kaip sužadinimo šviesą po to, kai sužadina bandinyje esančias fluorescencines medžiagas, kad išspinduliuotų. įvairių spalvų fluorescencija, tada stebėkite padidindami objektyvą ir okuliarus.
Esant stipriam kontrasto fonui, net jei fluorescencija yra labai silpna, ją lengva atpažinti ir ji yra labai jautri. Jis daugiausia naudojamas tiriant ląstelių struktūrą ir funkciją bei cheminę sudėtį.
