Kuo skiriasi fluorescencinis mikroskopas ir apverstasis mikroskopas
Ląstelių kultūroje ir su juo susijusiuose darinių eksperimentuose mikroskopas yra labai svarbus instrumentas. Šiuo metu rinkoje yra įvairių tipų mikroskopų. Išsirinkti poreikius atitinkantį ir pritaikomą mikroskopą – iššūkis. Toliau pateikiamas įvadas į apverstų mikroskopų ir fluorescencinių mikroskopų principus, kad galėtumėte lengvai pasirinkti.
Apverstojo mikroskopo sudėtis yra tokia pati kaip ir įprasto mikroskopo, daugiausia susidedanti iš trijų dalių: mechaninės dalies, apšvietimo dalies ir optinės dalies.
Apverstojo mikroskopo sudėtis yra tokia pati kaip ir įprasto vertikaliojo mikroskopo, išskyrus tai, kad objektyvo lęšis ir apšvietimo sistema yra atvirkščiai – pirmasis yra po scena, o antrasis – virš scenos.
Tokia konstrukcija gali ženkliai išplėsti efektyvų atstumą tarp apšvietimo koncentravimo sistemos ir scenos, o tai patogu dėti storesnius stebimus objektus, tokius kaip kultivavimo indai ir ląstelių kultūros buteliai (žinoma, yra ir stiklinių stiklelių ir pan.) , o kartu ir atstumas tarp objektyvo lęšio ir medžiagos Darbinis atstumas tarp jų neturi būti labai didelis.
Apverstieji mikroskopai naudojami mikroorganizmų, ląstelių, bakterijų, audinių kultūrų, suspensijų, nuosėdų ir kt. stebėjimui medicinos ir sveikatos padaliniuose, aukštosiose mokyklose, mokslinių tyrimų institutuose. Jis gali nuolat stebėti ląstelių, bakterijų ir kt. dauginimosi ir dalijimosi procesą auginimo terpėje ir gali fotografuoti bet kokias proceso formas.
Jis plačiai naudojamas citologijos, parazitologijos, onkologijos, imunologijos, genų inžinerijos, pramoninės mikrobiologijos, botanikos ir kitose srityse.
Fluorescencinė mikroskopija naudojama tiriant medžiagų absorbciją ir transportavimą ląstelėse, cheminių medžiagų pasiskirstymą ir lokalizaciją ir kt.
Apžiūrimam objektui yra du fluorescencijos generavimo būdai: autofluorescencija, kuri skleidžia fluorescenciją iš karto po apšvitinimo ultravioletine šviesa;
Kai kurios ląstelėse esančios medžiagos, pavyzdžiui, chlorofilas, po ultravioletinių spindulių apšvitinimo gamina autofluorescenciją; nors kai kurios medžiagos pačios negali fluorescuoti, jos taip pat gali skleisti antrinę fluorescenciją po to, kai yra nudažytos fluorescenciniais dažais arba fluorescuojančiais antikūnais, apšvitinus ultravioletiniais spinduliais.
Fluorescencinis mikroskopas naudoja taškinį šviesos šaltinį, turintį didelį šviesos efektyvumą, kad išspinduliuotų tam tikro bangos ilgio šviesą (ultravioletinė šviesa 365 nm arba purpurinė mėlyna šviesa 420 nm) per filtrų sistemą kaip sužadinimo šviesa, o sužadinus bandinyje esančias fluorescencines medžiagas, išspinduliuoja įvairios fluorescencijos. spalvos, tada Stebėjimas atliekamas padidinus objektyvo objektyvą ir okuliarą.
Tokiu būdu, esant stipriam kontrastiniam fonui, net jei fluorescencija yra labai silpna, ją lengva atpažinti ir jos jautrumas yra didelis. Jis daugiausia naudojamas ląstelių struktūros ir funkcijos bei cheminės sudėties tyrimams.
