Fluorescencinės mikroskopijos naudojimas: metodai ir įgūdžiai
Fluorescencinio mikroskopo techniniai parametrai 1. Plataus kampo okuliaras 2. Achromatinis objektyvas 3. Keturių angų objektyvo keitiklis 4. Epi-fluorescencinis prietaisas Mėlynas (B) Žalias (G) sužadinimo sistema 100W gyvsidabrio lempa 5. Bendraašis stambaus ir smulkaus fokusavimo reguliavimo mechanizmas: reguliavimas Fokusavimo diapazonas: 15 mm Mikro judėjimo tinklelio reikšmė: 0,002 mm 6. Dvisluoksnis mechaninis stalas Išilginio judėjimo diapazonas: 70 mm Šoninio judėjimo diapazonas: 50 mm
Naudokite įgūdžių metodą
(1) Stiklinė stiklinė
Stiklo stiklelio storis turi būti nuo 0,8 iki 1,2 mm. Per storas stiklelis, viena vertus, sugers daugiau šviesos, kita vertus, sužadinimo šviesa negali būti sutelkta ant bandinio. Skaidrės turi būti lygios, vienodo storio ir be akivaizdžios autofluorescencijos. Kartais naudojamos kvarcinio stiklo skaidrės.
(2) Dangtis stiklas
Dengiamojo stiklo storis apie 0,17 mm, lygus. Siekiant sustiprinti sužadinimo šviesą, taip pat gali būti naudojamas interferencinis dengiantis stiklas, kuris yra specialus dengiantis stiklas, padengtas keliais sluoksniais medžiagų (pvz., magnio fluorido), kurios turi skirtingą trukdžių poveikį skirtingo bangos ilgio šviesai, todėl gali būti fluorescencija vyksta sklandžiai. Jaudinanti šviesa praeina ir atsispindi, o ši atspindėta sužadinimo šviesa sužadina bandinį.
(3) Pavyzdys
Audinių griežinėliai ar kiti mėginiai neturi būti per stori. Jei jis per storas, didžioji dalis sužadinimo šviesos bus sunaudota apatinėje bandinio dalyje, o viršutinė dalis, kurią tiesiogiai stebi objektyvo lęšis, nebus visiškai sužadinta. Be to, ląstelių persidengimas arba priemaišų danga turi įtakos sprendimui.
(4) Montavimo priemonė
Glicerinas dažniausiai naudojamas kaip tvirtinimo priemonė, kuri turi būti be autofluorescencijos, bespalvė ir skaidri, o fluorescencijos ryškumas yra ryškesnis, kai pH 8.{1}}.5, ir nėra lengva greitai išblukti. Todėl kaip tvirtinimo priemonė paprastai naudojamas vienodas glicerolio ir 0,5 mol/l karbonato buferinio tirpalo, kurio pH nuo 9.0 iki 9,5, mišinys.
(5) veidrodinė alyva
Paprastai, stebint mėginius su tamsaus lauko fluorescenciniais mikroskopais ir panardinamaisiais lęšiais, būtina naudoti imersinę alyvą. Geriausia naudoti specialią nefluorescencinę imersinę alyvą. Vietoj to taip pat galima naudoti minėtą gliceriną, taip pat galima naudoti skystą parafiną, tačiau lūžio rodiklis yra žemas, o tai turi nedidelę įtaką vaizdo kokybei. Įtaka.
