Vertikalus biofluorescencinis mikroskopas
Fluorescencinės mikroskopijos principas yra naudoti labai efektyvų taškinį šviesos šaltinį (pvz., Ypač aukšto slėgio gyvsidabrio lempą), kad būtų galima skleisti tam tikrą šviesos bangos ilgį (pvz., Ultravioletinę šviesą 3650 λ arba purpurinę mėlyną šviesą 4200 λ) per spalvų filtrų sistemą kaip sužadinimo šviesą, kuri sužadina fluorescencines medžiagas, susijusias su įvairiomis spalvomis, kad emitos būtų įvairios fluorescizmo spalvomis. Tada jis filtruojamas blokuojančiu (arba slopinančiu) filtru už objektyvo ir stebimas per didėjantį okuliaro efektą.
Blokuojantis filtras turi dvi funkcijas: pirma, jis sugeria ir blokuoja sužadinimo šviesą, įeinančią į okuliarą, kad išvengtų trukdžių fluorescencijos ir pažeistų akis; Antrasis yra pasirinkti ir leisti specifinę fluorescenciją praeiti pro šalį, parodant specifinę fluorescencinę spalvą.
Fluorescenciniai mikroskopai gali būti suskirstyti į du tipus, remiantis šviesos kelio principu:
1. Transmisijos fluorescencijos mikroskopas
Senesni fluorescenciniai mikroskopai naudoja prožektorių, kad sužadintų fluorescenciją, perduodant sužadinimo šviesos šaltinį per bandinio medžiagą. Jo pranašumas yra stipri fluorescencija esant mažam padidinimui, tačiau jo trūkumas yra tas, kad jos fluorescencija mažėja didėjant padidinimui. Taigi jis tinka tik stebint didesnes pavyzdžių medžiagas.
2. Krentantis šviesos fluorescencinis mikroskopas
Sužadinimo lemputė krinta žemyn nuo objektyvojo objektyvo ant bandinio paviršiaus, naudojant tą patį objektyvą kaip ir apšvietimo kondensatorius ir objektyvą, skirtą fluorescencijai rinkti.
Prie optinio kelio reikia pridėti dvigubą spalvų pluošto skirstytuvą (dichroic veidrodį), kuris sudaro 45 laipsnių kampą su optine ašimi. Sužadinimo lemputė atsispindi objektyvu objektyvu ir daugiausia dėmesio skiria mėginiui. Mėginio sukuriama fluorescencija, taip pat sužadinimo lemputė, atsispindi iš objektyvaus objektyvo paviršiaus ir dangtelio stiklo, tuo pačiu metu įveskite objektyvą ir grįžtame prie dvigubos spalvos pluošto skirstytuvo, kad atskirtų sužadinimo šviesą ir fluorescenciją. Tada likusį sužadinimo lemputę blokuoja filtro absorbcija. Jei naudojami skirtingi sužadinimo filtrų deriniai, dvigubų spalvų pluošto separatoriai ir blokuojantys filtrai, jie gali patenkinti skirtingų fluorescencinių reakcijų produktų poreikius.
Šio fluorescencinio mikroskopo pranašumai yra vienodas lauko apšvietimas, aiškus vaizdas ir stipresnė fluorescencija, didesniam padidinimui.
