Yra dviejų tipų fluorescenciniai mikroskopai, pagrįsti jų šviesos keliais.
1. Perdavimo fluorescencinis mikroskopas: sužadinimo šviesos šaltinis praeina per bandinio medžiagą per kondensatorių, kad sužadintų fluorescenciją. Paprastai naudojamas tamsaus lauko kolektorius arba gali būti naudojamas įprastas kolektorius, o reflektorius sureguliuojamas taip, kad sužadinimo šviesa būtų nukreipta ir iš šono spinduliuojama į bandinį. Tai senesnis fluorescencinis mikroskopas. Privalumas yra tas, kad fluorescencija yra stipri esant mažam padidinimui, tačiau trūkumas yra tas, kad fluorescencija silpnėja, kai padidinimas didėja. Todėl geriau stebėti didesnių bandinių medžiagas.
2. Epifluorescencinis mikroskopas yra naujo tipo fluorescencinis mikroskopas, sukurtas šiais laikais. Skirtumas nuo to, kas išdėstyta aukščiau, yra tas, kad sužadinimo šviesa krenta žemyn nuo objektyvo iki bandinio paviršiaus, tai yra, tas pats objektyvas naudojamas kaip apšvietimo kondensatorius ir objektyvas fluorescencijai surinkti. Į optinį kelią reikia pridėti dviejų spalvų pluošto skirstytuvą, kuris yra 45% optinio urano. Kampas, sužadinimo šviesa atsispindi objektyvo lęšyje ir sukoncentruojama į mėginį. Mėginio generuojama fluorescencija ir sužadinimo šviesa, kurią atspindi objektyvo lęšio paviršius ir dengiančiojo stiklo paviršius, tuo pačiu metu patenka į objektyvo lęšį ir grįžta į dichromatinį pluošto skirstytuvą, kad sužadinimo šviesa, atskirta nuo fluorescencijos, liekamasis sužadinimas. tada šviesą sugeria blokuojantis filtras. Jei naudojate skirtingus sužadinimo filtrų / dviejų spalvų pluošto skirstytuvų / blokuojančių filtrų derinių įdėklus, galite patenkinti skirtingų fluorescencinių reakcijų produktų poreikius. Šio tipo fluorescencinio mikroskopo pranašumas yra tas, kad matymo laukas yra tolygiai apšviestas, vaizdas yra aiškus ir kuo didesnis padidinimas, tuo stipresnė fluorescencija.
(2) Kaip naudoti fluorescencinį mikroskopą.
1. Įjunkite šviesos šaltinį ir itin aukšto slėgio gyvsidabrio lempa turi įkaisti keletą minučių, kad pasiektų ryškiausią tašką.
2. Transmisijos fluorescenciniams mikroskopams tarp šviesos šaltinio ir kondensatoriaus reikia sumontuoti reikiamą sužadinimo filtrą, o už objektyvo lęšio turi būti sumontuotas atitinkamas blokuojantis filtras. Epifluorescenciniai mikroskopai turi įterpti reikiamą sužadinimo filtrą / dviejų spalvų pluošto skirstytuvą / blokuojančią filtrą į šviesos kelio angą.
3. Mažo didinimo mikroskopu stebėkite ir sureguliuokite šviesos šaltinio centrą pagal skirtingų modelių fluorescencinių mikroskopų reguliavimo įtaisus taip, kad jis būtų visos apšvietimo vietos centre.
4. Padėkite mėginio gabalėlį ir sureguliuokite fokusavimą, kad galėtumėte stebėti. Naudodami atkreipkite dėmesį: Nežiūrėkite į filtrą tiesiai akimis, kad nepažeistumėte akių; stebėdami mėginį su alyvos lęšiu, turite naudoti specialų nefluorescencinį alyvos lęšį; aukšto slėgio gyvsidabrio lempa negali būti atidaryta iš karto po jos išjungimo. Jį galima vėl įjungti po 5 minučių, kitaip jis bus nestabilus ir turės įtakos gyvsidabrio lempos tarnavimo laikui.
(3) Stebėkite fluorescenciniu mikroskopu ant mokymo platformos, naudodami mėlynai violetinės šviesos filtrą. Matyti, kad ištrauka yra o. Ląstelėse, nudažytose 01% akridino oranžiniu fluorescenciniu dažikliu, branduolys ir citoplazma sužadinami, kad susidarytų dvi skirtingos fluorescencijos spalvos (tamsiai žalia ir oranžinė raudona).
