Yra dviejų tipų fluorescenciniai mikroskopai, pagrįsti jų šviesos keliais:
1. Perdavimo fluorescencinis mikroskopas: sužadinimo šviesos šaltinis naudojamas fluorescencijai sužadinti, praleidžiant mėginio medžiagą per kondensatoriaus lęšį. Taip pat gali būti naudojami įprastai naudojami tamsaus lauko koncentratoriai, o įprasti koncentratoriai gali būti naudojami reflektoriaus reguliavimui, kad sužadinimo šviesa būtų nukreipta ir nukreipta į bandinį. Tai gana senamadiškas fluorescencinis mikroskopas. Jo pranašumas yra stipri fluorescencija esant mažam padidinimui, tačiau trūkumas yra tas, kad jo fluorescencija mažėja didėjant didinimui. Todėl geriau stebėti didesnes medžiagas.
2. Krintančios šviesos fluorescencinis mikroskopas yra naujo tipo fluorescencinis mikroskopas, sukurtas šiais laikais. Skirtingai nei aukščiau, sužadinimo šviesa krinta nuo objektyvo žemyn ant bandinio paviršiaus, naudojant tą patį objektyvo lęšį kaip apšvietimo kondensatorių ir objektyvo lęšį fluorescencijai surinkti. Į optinį kelią, kuris yra 45 laipsnių atstumu nuo šviesaus urano, reikia pridėti dviejų spalvų pluošto skirstytuvą. Kampas, sužadinimo šviesa atsispindi objektyvo lęšyje ir sufokusuojama į pavyzdį. Mėginio generuojama fluorescencija, taip pat sužadinimo šviesa, atsispindinti nuo objektyvo lęšio paviršiaus ir dengiamojo stiklo, patenka į objektyvo lęšį ir grįžta į dviejų spalvų pluošto skirstytuvą, atskiriant sužadinimo šviesą ir fluorescenciją. Tada likusią sužadinimo šviesą sugeria blokuojantis filtras. Jei naudojami skirtingi sužadinimo filtrų / dviejų spalvų pluoštų separatorių / blokuojančių filtrų deriniai, jie gali patenkinti skirtingų fluorescencinių reakcijos produktų poreikius. Šio fluorescencinio mikroskopo pranašumai yra vienodas lauko apšvietimas, aiškus vaizdas ir stipresnė fluorescencija su didesniu padidinimu.
Fluorescencinio mikroskopo naudojimo instrukcijos
1. Įjunkite šviesos šaltinį. Itin aukšto slėgio gyvsidabrio lempą reikia keletą minučių pašildyti, kad ji pasiektų maksimalų ryškumą.
2. Atliekant transmisijos fluorescencinę mikroskopiją, tarp lempos šaltinio ir kondensatoriaus reikia sumontuoti reikiamą sužadinimo filtrą, o už objektyvo – atitinkamą blokuojantį filtrą. Krintančios šviesos fluorescencinis mikroskopas turi įkišti reikiamą sužadinimo filtrą/dviejų spalvų pluošto skirstytuvą/blokavimo filtro bloką į optinio kelio angą.
3. Stebėkite mažos galios mikroskopu ir sureguliuokite šviesos šaltinio centrą pagal skirtingų tipų fluorescencinių mikroskopų reguliavimo įtaisą taip, kad jis būtų visos apšvietimo taško centre.
4. Padėkite bandinį ir sufokusuokite jį stebėjimui. Naudodami reikia atkreipti dėmesį: prieš montuodami filtrą nežiūrėkite tiesiai akimis, kad nepažeistumėte akių; Stebint mėginius alyvos mikroskopu, reikia naudoti specialų nefluorescencinį alyvos mikroskopą; Išjungus aukšto slėgio gyvsidabrio lempą, jos negalima iš karto vėl įjungti. Iš naujo paleisti užtrunka 5 minutes, kitaip jis bus nestabilus ir turės įtakos gyvsidabrio lempos eksploatavimo trukmei.
(3) Stebint fluorescenciniu mikroskopu ant mokymo platformos, naudojant mėlynos violetinės šviesos filtrą, galima pamatyti ląsteles, nudažytas 0,01 % akridino oranžinės spalvos fluorescenciniais dažais. Branduolys ir citoplazma sužadinami, kad susidarytų dvi skirtingos fluorescencijos spalvos (tamsiai žalia ir oranžinė raudona).
