Ypatinga fluorescencinio mikroskopo struktūra apima:
(I) Spalvų filtrų sistema
Spalvų filtras yra svarbi fluorescencinio mikroskopo dalis, jo pagrindiniai komponentai yra sužadinimo šviesos filtras (pirmasis barjerinis filtras), spinduliuotės šviesos filtras (antrasis barjerinis filtras) ir pusiau permatomas ir pusiau antifiltras (spindelį skaidantis veidrodis) . Įvairių gamintojų spalvų filtrų modeliai, pavadinimas dažnai nėra vienodas.
1. Sužadinimo šviesos filtras ir emisijos šviesos filtras: atsižvelgiant į šviesos šaltinį ir fluorochromo charakteristikas, paprastai pasirenkami šie trys suderinimo tipai, kad būtų užtikrintas tam tikras sužadinimo šviesos bangos ilgio diapazonas ir mėginio sužadinimas fluorescencija okuliaras vaizdo gavimui.
UV sužadinimas: sužadinimo šviesos filtras leidžia perduoti UV šviesą ir blokuoja matomą šviesą, viršijančią 400 nm. Atitinkamas emisijos filtras leidžia prasiskverbti mėlynai šviesai, kuri regėjimo lauke atrodo mėlyna, pvz., dažant DAPI.
Mėlynos šviesos sužadinimas: sužadinimo šviesos filtras leidžia prasiskverbti mėlynai šviesai, blokuodamas kitus šviesos bangos ilgius. Atitinkamas emisijos filtras leidžia prasiskverbti žaliai šviesai, pvz., GFP dažymo žymenims.
Žalias sužadinimas: sužadinimo filtras leidžia prasiskverbti žaliai šviesai, blokuodamas kitus bangos ilgius. Atitinkamas emisijos filtras paprastai praleidžia raudoną šviesą, pvz., rodaminą.
2. Pusiau skaidrus ir pusiau atspindintis filtras: jo vaidmuo yra visiškai blokuoti šviesos sužadinimą per atspindį; ir per atitinkamą skleidžiamos šviesos bangų ilgių diapazoną. Jo modelis ir šviesos filtrų sužadinimas bei šviesos filtrų emisija atitinka.
(B) objektyvas ir okuliaras
Galima pritaikyti įvairius objektyvus, tačiau * geras simetriškų, achromatinių objektyvų pasirinkimas, nes autofluorescencija yra labai maža, o šviesos perdavimo savybės (bangos ilgio diapazonas) tinka fluorescencijai. Kadangi vaizdo fluorescencinis ryškumas mikroskopo regėjimo lauke yra proporcingas objektyvo snukio dažnio kvadratui ir atvirkščiai proporcingas jo padidinimui, todėl norint pagerinti fluorescencinio vaizdo ryškumą, objektyvas su dideliu snukio dažniu būti naudojamas. Ypač dėl fluorescencijos nėra pakankamai stiprūs mėginiai, turėtų naudoti didelį burnos greitį, didelį šviesos pralaidumo objektyvą, su kuo mažesniu okuliaru.
C) kiti optiniai įrenginiai
Atšvaitas, jo atspindintis sluoksnis dažniausiai yra padengtas aliuminiu, nes aliuminis ultravioletinėje ir matomoje šviesoje sugeria mėlynai violetinę sritį mažiau, atspindi iki 90% ar daugiau (o sidabro atspindys yra tik 70%). Paprastai naudojami plokšti atšvaitai. Prožektorių veidrodis, sukurtas ir pagamintas specialiai fluorescencinei mikroskopijai prožektorių veidrodis, pagamintas iš kvarcinio stiklo ar kito UV spinduliams skaidraus stiklo. Krintančios šviesos įtaisas, kuris, be perduodamos šviesos šaltinio funkcijos, labiau tinka nepermatomiems ir peršviečiamiems mėginiams, tokiems kaip stora plėvelė, filtro membrana, kolonija, audinių kultūra ir kiti tiesioginio stebėjimo mėginiai. Pastaraisiais metais buvo sukurtas naujo tipo fluorescencinis mikroskopas, kuriame naudojamas krintančios šviesos prietaisas, vadinamas krintančios fluorescencijos mikroskopu.
(D) šviesos šaltinis
Šiuo metu kaip šviesos šaltinis naudojama 50 arba 100 W aukšto slėgio gyvsidabrio lempa. Dviejų elektrodų iškrova, kurią sukelia gyvsidabrio išgaravimas, oro slėgis greitai kyla (šis procesas paprastai trunka apie 5–15 min.), o sklindant šviesos kvantams, išsiskiriančios šviesos bangos ilgio pakanka sužadinti. visų tipų fluorescencinės medžiagos, todėl dažniausiai naudojama fluorescencinė mikroskopija.
Gyvsidabrio lempų eksploatavimo laikas yra palyginti trumpas, paprastai 200 valandų, o dėl šio eksploatavimo trukmės apribojimo pastaraisiais metais buvo plačiai naudojamas naujas fluorescencinės šviesos šaltinis X-Cite dėl ilgo 2000 valandų lempos veikimo ir lankstaus naudojimo. - Išankstinis pašildymas nereikalingas, o išėmus iš dėžutės, jis paruoštas naudoti.
