Skirtumas tarp MINI skenuojančio elektroninio mikroskopo SEM ir optinio mikroskopo
Elektronų mikroskopas yra didelis instrumentas, kuris kaip apšvietimo šaltinį naudoja elektronų pluoštą ir vaizduoja mėginį fluorescenciniame ekrane, perduodant arba atspindint elektronų srautą ir daugiapakopį elektromagnetinio lęšio stiprinimą. Elektroninis mikroskopas matomą šviesą pakeičia elektronų srautu, o lęšis – magnetiniu lauku, leidžiančiu pakeisti elektronų judėjimą. Jame naudojami rentgeno spinduliai, kurių bangos ilgiai yra daug trumpesni nei įprasta matoma šviesa, ir turi didelę skiriamąją gebą. Kita vertus, optinis mikroskopas yra optinis instrumentas, kuris naudoja matomos šviesos apšvietimą, kad sudarytų padidintus mažų objektų vaizdus. Apibendrinant galima pasakyti, kad tarp elektroninių mikroskopų ir optinių mikroskopų yra keletas pagrindinių skirtumų:
1. Įvairūs apšvietimo šaltiniai. Elektronų mikroskopijoje naudojamas apšvietimo šaltinis yra elektronų pistoleto skleidžiamas elektronų srautas, o šviesos veidrodžio apšvietimo šaltinis yra matoma šviesa (saulės šviesa arba šviesa). Dėl to, kad elektronų srauto bangos ilgis yra daug trumpesnis už šviesos bangos ilgį, elektroninės mikroskopijos stiprinimas ir skiriamoji geba yra žymiai didesni nei šviesos veidrodžio.
2. Skirtingi lęšiai. Objektyvas, kuris atlieka didinamąjį vaidmenį elektroninėje mikroskopijoje, yra elektromagnetinis lęšis (apvali elektromagnetinė ritė, galinti sukurti magnetinį lauką * srityje), o šviesos lęšio objektyvas yra optinis lęšis, pagamintas iš šlifuoto stiklo. Elektroninėje mikroskopijoje yra trys elektromagnetinių lęšių rinkiniai, kurie savo funkcijomis yra lygiaverčiai optinių lęšių kondensatoriui, objektyvui ir okuliarui.
3. Skirtingi vaizdavimo principai. Elektriniame veidrodyje bandomąjį pavyzdį veikiantis elektronų spindulys sustiprinamas elektromagnetiniu lęšiu ir projektuojamas į fluorescencinį ekraną vaizdavimui arba uždedamas ant šviesai jautrios plėvelės vaizdavimui. Elektronų intensyvumo skirtumo mechanizmas yra tas, kad kai elektronų pluoštas veikia bandomąjį pavyzdį, krintantys elektronai susiduria su medžiagos atomais ir dėl to atsiranda sklaida. Dėl skirtingų elektronų sklaidos laipsnių skirtingose mėginio dalyse, mėginio elektroninis vaizdas pateikiamas intensyvumu. Mėginio objekto vaizdas optiniame veidrodyje pateikiamas kaip ryškumo skirtumas, atsirandantis dėl to, kiek šviesos sugeria skirtingos tiriamojo mėginio struktūros.
4. Naudojamų bandinių paruošimo būdai yra skirtingi. Audinių ir ląstelių mėginių, naudojamų elektroninės mikroskopijos stebėjimui, paruošimo procesas yra sudėtingas, sudėtingas ir brangus. Mėginių ėmimo, fiksavimo, dehidratacijos ir įterpimo etapuose reikalingi specialūs reagentai ir operacijos. Įdėjus įterptus audinių blokus, naudojant itin ploną pjaustyklę, reikia supjaustyti itin plonus 50-100nm storio mėginio griežinėlius. Mikroskopu stebimi mėginiai paprastai dedami ant stiklinio stiklelio, pavyzdžiui, įprasti audinių pjūvių mėginiai, ląstelių tepinėlio mėginiai, audinių suspaudimo mėginiai ir ląstelių lašų mėginiai.
Optinio mikroskopo skiriamoji geba yra susijusi su šviesos bangų bangos ilgiu. Objektams, kurie yra artimi šviesos bangų bangos ilgiui arba mažesni už juos, optiniai mikroskopai yra bejėgiai. Elektronų judėjimo bangos ilgis yra daug ilgesnis nei šviesos bangų, todėl galima pamatyti mažesnius objektus. Optinis mikroskopas yra didinamoji vaizdo gavimo sistema, sudaryta iš optinių lęšių rinkinio, o elektronų mikroskopas naudoja elektronų srautą vietoj matomos šviesos, magnetinį lauką, o ne lęšį, leidžiantį elektronų judėjimui pakeisti fotonus ir matyti mažesni objektai nei matomi optine sistema.
