Pagrindiniai fazinio kontrasto mikroskopo veikimo principai
Fazinio kontrasto mikroskopas yra specialaus tipo mikroskopas, kuris šviesos sklidimo skirtumą (ty fazių skirtumą), susidarantį, kai šviesa praeina pro skaidraus bandinio detales, paverčia šviesos intensyvumo skirtumu.
Kai šviesa praeina per gana skaidrų pavyzdį, šviesos bangos ilgis (spalva) ar amplitudė (ryškumas) reikšmingai nesikeičia. Dėl to nedažytų mėginių (pvz., gyvų ląstelių) morfologiją ir vidinę struktūrą dažnai sunku atskirti žiūrint įprastu šviesos mikroskopu. Tačiau dėl skirtingų ląstelės dalių lūžio rodiklio ir storio skiriasi tiesioginės ir difrakcinės šviesos optinis diapazonas, kai ji praeina pro tokį pavyzdį. Didėjant arba mažėjant šviesos diapazonui, pasikeičia pagreitėjusių arba vėluojančių šviesos bangų fazė (sukuriama fazių skirtumas). Žmogaus akis negali pajusti šviesos fazių skirtumo, tačiau fazinio kontrasto mikroskopas gali panaudoti šviesos interferencijos reiškinį per specialius prietaisus – žiedinę diafragmą ir fazinę plokštę – paversti šviesos fazių skirtumą į skirtumą. amplitudė (šviesa ir tamsa), kurią gali suvokti žmogaus akis, todėl originalūs skaidrūs objektai rodo akivaizdžius šviesos ir tamsos skirtumus ir padidina kontrastą, kad galėtume. Kontrastas padidinamas, kad galėtume aiškiau stebėti gyvuosius. ląsteles ir kai kurias smulkias struktūras ląstelių viduje, kurių negalima matyti pro įprastą optinį mikroskopą ir tamsaus lauko mikroskopą arba jos negali būti aiškiai matomos.
Fazinio kontrasto mikroskopo vaizdavimo principas: apžiūrint veidrodį, šviesos šaltinis gali prasiskverbti tik per skaidrų žiedinės diafragmos žiedą, o po koncentratoriaus susilieti į šviesos spindulį, kai šis šviesos spindulys praeina per apžiūrimą objektą. , dėl skirtingų šviesos dalių diapazono skirtumo šviesa yra įvairiais laipsniais nukreipiama (difrakcija). Kadangi permatomo žiedo suformuotas vaizdas tiksliai patenka į židinio plokštumą po to, kai objektyvo lęšis ir konjuguotas fazinės plokštės paviršius sutampa. Dėl to tiesioginė šviesa, kuri nėra nukreipta, praeina per konjuguotą plokštumą, o nukreipta išsklaidyta šviesa praeina per kompensavimo plokštumą. Dėl konjuguoto paviršiaus fazinėje plokštėje ir kompensuojant skirtingą paviršiaus pobūdį, jie praeis per šias dvi šviesos dalis, kad sukurtų tam tikrą fazių skirtumą ir dviejų šviesos grupių slopinimo intensyvumą, o po to lęšio konvergencija, o tada grįžtama ta pačia šviesa, kad tiesioginė šviesa ir išsklaidyta šviesa sukurtų šviesos trukdžius, pakeistų fazių skirtumą pagal amplitudės skirtumą. Tokiu būdu, atliekant fazinio kontrasto mikroskopą, šviesa per bespalvį skaidrų kūną daro žmogaus akis neatskiriamą fazių skirtumą, o žmogaus akis gali atskirti amplitudės skirtumą (šviesos ir tamsos skirtumą).