Fluorescencinio mikroskopo techniniai parametrai ir naudojimo įgūdžiai
Fluorescencinio mikroskopo techniniai parametrai 1. Plataus kampo okuliaras 2. Achromatinis objektyvas 3. Keturių skylių objektyvo keitiklis 4. Krintantis fluorescencinis prietaisas Mėlynas (B) Žalias (G) žadinimo sistema 100W gyvsidabrio lempa 5. Koaksialinė šiurkšti mikro fokusavimo mechanizmas: fokusavimo diapazonas 15 mm Mikro tinklelio vertė 0,002 mm 6. Dvisluoksnis mechaninis darbastalio išilginio judėjimo diapazonas: 70 mm Šoninio judėjimo diapazonas: 50 mm
Fluorescencinio mikroskopo techniniai parametrai
1. Plataus kampo okuliaras
2. Achromatinis objektyvas
3. Keturių angų objektyvo keitiklis
4. Mėlyna (B) žalia (G) krintančios fluorescencijos įtaiso sužadinimo sistema 100 W gyvsidabrio lempa
Bendraašis grubus mikrofokusavimo mechanizmas: fokusavimo diapazonas: 15 mm, mikro tinklelio reikšmė: 0,002 mm
6. Dvisluoksnis mechaninis darbastalis
Išilginio judėjimo diapazonas: 70 mm Šoninio judėjimo diapazonas: 50 mm
Fluorescencinės mikroskopijos naudojimo patarimai ir metodai
(1) Skaidrė
Skaidrės storis turi būti nuo 0,8 iki 1,2 mm. Jei skaidrė per stora, viena vertus, ji sugeria per daug šviesos, kita vertus, ji negali sukelti sužadinimo šviesos kaupimosi ant bandinio. Skaidrė turi būti lygi ir švari, vienodo storio ir be reikšmingos savaiminės fluorescencijos. Kartais prireikia kvarcinio stiklo stiklelių.
(2) Dengiamas stiklas
Dangčio stiklo storis yra apie 0,17 mm, jis yra lygus ir švarus. Siekiant sustiprinti sužadinimą, taip pat galima naudoti trikdžius dengiantį stiklą. Tai specialus dengiantis stiklas, padengtas keliais medžiagų sluoksniais (pavyzdžiui, magnio fluoridu), kurios turi skirtingą trukdžių poveikį skirtingo ilgio šviesos bangoms. Jis gali leisti fluorescencijai sklandžiai praeiti, kartu atspindėdamas sužadinimą, kuris gali sužadinti mėginį.
(3) Pavyzdys
Audinių dalys ar kiti mėginiai neturi būti per stori. Pavyzdžiui, jei jie yra per stori, didžioji dalis sužadinimo šviesos sunaudojama apatinėje bandinio dalyje, o viršutinė dalis, kurią tiesiogiai stebi objektyvo lęšis, nėra pakankamai sužadinta. Be to, ląstelių sutapimas arba priemaišų maskavimas gali turėti įtakos sprendimui.
(4) Montavimo priemonė
Glicerinas dažniausiai naudojamas kaip tvirtinimo medžiaga, jis turi būti be savaiminės fluorescencijos, bespalvis ir skaidrus. Fluorescencijos ryškumas yra ryškesnis, kai pH yra nuo 8,5 iki 9,5, ir nėra lengva greitai išnykti. Todėl kaip tvirtinimo priemonė paprastai naudojamas lygiavertis glicerolio ir 0,5 mol/l karbonato buferinio tirpalo mišinys, kurio pH nuo 9.{7}} iki 9,5.
(5) Veidrodinė alyva
Paprastai, naudojant tamsaus lauko fluorescencinį mikroskopą ir alyvos mikroskopą mėginiams stebėti, būtina naudoti lęšių aliejų. Geriausia naudoti specialią nefluorescencinę lęšių alyvą, kurią taip pat galima pakeisti jau minėtu gliceroliu. Galima naudoti ir skystąjį parafiną, tačiau lūžio rodiklis žemas, o tai turi nedidelę įtaką vaizdo kokybei.
