Daugiafotonių lazerinių skenuojamųjų mikroskopų stiprybės ir apribojimai
Privalumai yra tokie:
1. Sužadintas raudonos arba infraraudonosios šviesos, šviesos sklaida nedidelė (smulkių dalelių sklaida atvirkščiai proporcinga ketvirtajai bangos ilgio galiai).
2. Nereikia skylučių, galinčių surinkti daugiau išsklaidytų fotonų iš vaizdo skerspjūvio.
3. Smeigtukai negali atskirti išsklaidytų fotonų, skleidžiamų iš nesufokusuotų arba židinio sričių, o daugiafotonai turi geresnį signalo-ir-triukšmo santykį giliajame vaizde.
4. Ultravioletinė arba matoma šviesa, naudojama vieno fotono sužadinimui, mėginio lengvai sugeria ir susilpnina, kol pluoštas pasiekia židinio plokštumą, todėl sunku sužadinti gilius sluoksnius.
5. Kalbant apie biologinį mikroskopinį stebėjimą, pirmiausia reikia nepažeisti aktyvios paties organizmo būsenos, palaikyti vandens, jonų koncentracijos, deguonies ir maistinių medžiagų cirkuliaciją. Šviesos stebėjimo srityje tiek šiluminė, tiek fotonų energija turi likti apšvitos dozės ribose ir šviesos energija, kuri nepažeidžia ląstelių.
6. Daugiafotoninė mikroskopija taip pat turi daug privalumų. Kalbant apie trijų-matmenų skiriamąją gebą, gylio invaziją, sklaidos efektyvumą, foninį apšvietimą, signalo-ir-triukšmo santykį, valdymą ir kt., lazeriniai mikroskopai turi neprilygstamų ar pranašesnių savybių, kurių neturėjo ankstesni lazeriniai mikroskopai.
Daugiafotoninis konfokalinis lazerinis skenuojantis mikroskopas buvo išplėstas į įvairias tyrimų ir taikymo sritis. Jis gali atlikti trimačius neardomuosius natūralios būklės mėginių stebėjimus ir pagerinti sistemos skiriamąją gebą bei signalo- ir-triukšmo santykį. Naudojant medžiagos savybių pokyčius po kelių fotonų sužadinimo}} ir trijų{4 Taip pat galima pasiekti trimatę mikrogamybą bet kuria kryptimi, kuri turi didelę taikymo vertę. Galima manyti, kad toliau tobulėjant mechaninėms, medžiagų ir lazerinėms technologijoms, susijusioms su daugiafotonine konfokaline mikroskopija, daugiafotoninė konfokalinė lazerinė skenuojanti mikroskopija turės didesnį vystymąsi ir platesnį pritaikymą.
Trūkumai yra tokie:
1. Tik fluorescenciniam vaizdavimui.
2. Jei mėginyje yra chromoforų, galinčių sugerti sužadinimo šviesą, pvz., pigmentų, mėginys gali būti termiškai pažeistas.
3. Rezoliucija šiek tiek sumažinta, nors ją galima pagerinti vienu metu naudojant konfokalines mažas skylutes, signalas bus prarastas.
4. Dėl brangių itin greitų lazerių apribojimų daugiafotonų skenuojamųjų mikroskopų kaina yra gana didelė.
