Fluorescencinio mikroskopo naudojimo įgūdžiai ir metodai
Fluorescencinio mikroskopo techniniai parametrai 1. Plataus kampo okuliaras 2. Achromatinis objektyvas 3. Keturių skylučių objektyvo keitiklis 4. Švitęs fluorescencinis prietaisas mėlynas (b) žalias (g) žadinimo sistema 100W gyvsidabrio lempa 5. Koaksialinė šiurkšti mikrofokusavimo mechanizmas: fokusavimo diapazonas 15 mm, mikro tinklelio reikšmė 0,002 mm 6. Dvisluoksnio mechaninio darbastalio išilginis judėjimo diapazonas: 70 mm, šoninio judėjimo diapazonas: 50 mm.
Fluorescencinio mikroskopo naudojimo įgūdžiai ir metodai
(1) stiklinės skaidrės
Skaidrės storis turi būti nuo 0.8-1,2 mm iki 1,2 mm. Viena vertus, per storas stiklelis nesugers daug šviesos, kita vertus, sužadinimo šviesa nesikaups ant bandinio. Skaidrė turi būti lygi, vienodo storio ir be akivaizdžios savaiminės fluorescencijos. Kartais prireikia Shi Ying stiklinių skaidres.
(2) Dangtis stiklas
Dengiamasis stiklas yra maždaug 0,17 mm storio ir lygus. Siekiant sustiprinti sužadinimo šviesą, taip pat galima naudoti interferencinį dengiamąjį stiklą, kuris yra specialus dengiantis stiklas su keliais sluoksniais medžiagų (pvz., magnio fluorido), turinčių skirtingą trukdžių poveikį skirtingiems šviesos bangos ilgiams. Tai gali priversti fluorescenciją sklandžiai praeiti ir atspindėti sužadinimo šviesą, o ši atspindėta sužadinimo šviesa gali sužadinti bandinį.
(3) Pavyzdžiai
Audinių dalys ar kiti mėginiai neturi būti per stori. Jei jis per storas, didžioji dalis sužadinimo šviesos sunaudojama apatinėje bandinio dalyje, o viršutinė dalis, kurią tiesiogiai stebi objektyvo lęšis, nėra visiškai sužadinta. Be to, ląstelių sutapimas arba priemaišų maskavimas turi įtakos sprendimui.
(4) sandarinimo priemonė
Glicerolis dažniausiai naudojamas kaip sandarinimo medžiaga, kuri turi būti bespalvė ir skaidri, be savaiminės fluorescencijos. Fluorescencijos ryškumas yra ryškus, kai pH yra 8,5–9,5, ir nėra lengva greitai išnykti. Todėl lygiavertis glicerolio ir 0,5 mol/l PH9.0 ~ 9,5 karbonato buferio mišinys dažnai naudojamas kaip sandarinimo priemonė.
(5) veidrodinė alyva
Paprastai veidrodinė alyva turi būti naudojama stebint mėginius tamsaus lauko fluorescenciniu mikroskopu ir alyvos veidrodžiu. Geriausia naudoti specialią nefluorescencinę veidrodinę alyvą arba vietoj jos galima naudoti minėtą gliceriną. Galima naudoti ir skystąjį parafiną, tačiau lūžio rodiklis žemas, o tai turi nedidelę įtaką vaizdo kokybei.
