Fluorescencinio mikroskopo stiklelių paruošimo reikalavimai
(1) Stiklinė stiklinė
Skaidrės storis turi būti nuo 0,8 iki 1,2 mm. Jei stiklelis per storas, viena vertus, jis sugers daugiau šviesos, kita vertus, neleis sužadinimo šviesai kauptis ant bandinio. Stiklinis stiklelis turi būti lygus, vienodo storio ir neturėti akivaizdžios savaiminės fluorescencijos. Kartais prireikia kvarcinio stiklo stiklelių.
(2) Dengiamasis stiklelis
Dengiamojo stiklo storis yra apie 0,17 mm ir jis yra lygus. Siekiant sustiprinti sužadinimo šviesą, taip pat gali būti naudojamas trikdžius dengiantis stiklas. Tai specialiai sukurtas dengiantis stiklas su keliais sluoksniais medžiagų (pvz., magnio fluorido), kurios turi skirtingą trukdžių poveikį skirtingo bangos ilgio šviesai. Jis gali leisti fluorescencijai sklandžiai praeiti, o atspindžio sužadinimo šviesa gali sužadinti bandinį.
(3) Pavyzdys
Audinių griežinėliai ar kiti mėginiai neturi būti per stori. Jei jie yra per stori, didžioji dalis sužadinimo šviesos sunaudojama apatinėje bandinio dalyje, o viršutinė dalis, kurią tiesiogiai stebi objektyvo lęšis, nėra visiškai sužadinta. Be to, ląstelių sutapimas arba priemaišų maskavimas gali turėti įtakos sprendimui.
(4) Sandarinimo priemonė
Glicerinas dažniausiai naudojamas kaip tvirtinimo medžiaga, kuri neturi savaiminės fluorescencijos, bespalvė ir skaidri. Fluorescencijos ryškumas yra santykinai ryškus, kai pH 8.{1}}.5, todėl jį nėra lengva greitai išnykti. Todėl kaip sandarinimo priemonė paprastai naudojamas vienodas glicerolio ir 0,5 mol/L karbonato buferio, kurio pH 9.0-9.5, mišinys.
(5) Veidrodinė alyva
Naudojant tamsaus lauko fluorescencinį mikroskopą ir alyvos mikroskopą mėginiams stebėti, reikia naudoti veidrodinę alyvą. Galima naudoti specialią nefluorescencinę veidrodinę alyvą arba kaip pakaitalą glicerolį. Galima naudoti ir skystąjį parafiną, tačiau lūžio rodiklis yra mažas ir turi nedidelę įtaką vaizdo kokybei.
