Audinių bloko tūrio matavimas naudojant biologinius mikroskopus
Iki šiol kriofiksacija, šaldytas itin -plonas pjūvis ir džiovinimas šalčiu{1}} yra įprasti audinių ir ląstelių rentgeno mikroskopijos metodai. Pateikite šią išsamią informaciją apie šį metodą:
Biologinis mikroskopas su prožektoriumi gali judinti prožektorių aukštyn ir žemyn, kad būtų pasiektas vidutinis ryškumas, o kintamos diafragmos diafragma taip pat gali būti pakeista, kad būtų pasiektas vidutinis ryškumas. Jei šviesa yra iš saulės, prožektorius gali būti atitinkamai pakeltas ir kintamos šviesos diafragma gali būti atitinkamai padidinta. Jei šviesa per stipri, prožektorius gali būti atitinkamai nuleistas ir sankryžos diafragma atitinkamai sumažinta. Jei tokioje situacijoje vis tiek jaučiatės apakinti, galite pasirinkti tinkamą filtrą uždėti ant laikiklio po prožektoriumi. Šis ąžuolas gali pasiekti jus tenkinančio ryškumo. Žinoma, reguliuojant viršutinę ir apatinę prožektorių padėtį, galima pakeisti šviesos skaitymo diafragmos dydį ir parinkti tinkamus filtrus, o tam reikia tam tikro laiko praktikos ir patirties.
Labai svarbus biologinės mikroskopijos klausimas yra mėginių ėmimo ir ląstelių išskyrimo procesas. Po džiovinimo šalčiu ir dervos įterpimo (FD) užšaldytos itin plonos dalys turi būti kruopščiai apdorotos, siekiant užtikrinti, kad stebėjimo ir analizės metu nebūtų pažeistas kiekvienos dalies 65 elementų turinys. Dėl daugybės žingsnių ir didelių išlaidų, susijusių su rentgeno mikroanalizė, gaila padaryti neteisingas išvadas, jei analizuojamos ląstelės yra pažeistos arba žuvusios po ilgo ir kelių etapų apdorojimo. Miokardo ląstelės, atskirtos apdorojant želatinaze, yra dviejų formų: viena yra ilgos lazdelės formos, o kita - apskrito. Pastarasis reiškia mirštančias ląsteles, kurios yra pažeistos ląstelių atskyrimo proceso metu.
Šių dviejų tipų ląstelėse esančių elektrolitų kiekis ir pasiskirstymas biologiniu mikroskopu labai skiriasi. Žiediniuose kardiomiocituose Na yra labai didelis, o K – itin mažas, o Ca koncentracija linijiniuose dendrituose yra labai didelė. Patikrinus kitais analitiniais metodais, buvo įrodyta, kad didelis Na ir mažas K kiekis žiedinėse ląstelėse ir didelis Ca kiekis mitochondrijose yra membranos pažeidimo ląstelių atskyrimo metu rezultatas. Ląstelių ir audinių šalto fiksavimo metodas dažnai apima iš pradžių gesinimą, o vėliau jų laikymą skystame azote. Gesinanti fiksacija yra labai svarbi išsaugojimo efektui. Gyvose ląstelėse arba šviežiuose audiniuose gausu vandens, o gesinant ląstelių ar audinių dalys, kurios tiesiogiai liečiasi su šaltnešiu (ypač naudojant skystą azotą vėsinimui), dažniausiai pirmiausia užšaldomos ir fiksuojamos, susidaro „apvalkalas“, kuris trukdo sutraiškyti ir fiksuoti centrinę ląstelių dalį. Todėl, atliekant rentgeno spindulių mikroanalizę, dažnai nustatoma, kad ledo kristalai egzistuoja centrinėje didesnių ląstelių dalyje. Kad ši situacija nepasikartotų, kaip šaltnešis naudojama medžiaga, kurios lydymosi temperatūra aukštesnė nei skystojo azoto, bet žemesnė 806c. Šių medžiagų yra daug, tačiau jas nesunku gauti, o pigiausias yra koncentruotas propanas (virimo temperatūra 42,120 c, lydymosi temperatūra 187,10 c, molekulinė masė 44,1), kuris taip pat pasižymi greitu aušinimo greičiu. Tačiau jo trūkumas yra tai, kad jis yra degus.
