Lazerinio skenavimo daugiafotoninės mikroskopijos pranašumai patobulinti
Lazerinis skenuojantis daugiafotoninis mikroskopas yra reikšmingas optinės mikroskopijos patobulinimas, daugiausia pasireiškiantis gebėjimu stebėti gyvų ląstelių, fiksuotų ląstelių ir audinių giliąsias struktūras bei gauti aiškias ir ryškias daugiasluoksnes Z plokštumos struktūras, būtent optinius pjūvius, kurie gali būti naudojami trimatėms kietosioms bandinių struktūroms konstruoti. Konfokalinis mikroskopas naudoja lazerinį šviesos šaltinį, kuris išplečiamas, kad užpildytų visą objektyvo lęšio židinio plokštumą, o po to per objektyvo lęšio lęšių sistemą sujungiamas į labai mažus mėginio židinio plokštumos taškus. Pagal objektyvo objektyvo skaitmeninę diafragmą šviesaus apšvietimo taško skersmuo yra apie 0.25-0.8 μm, o gylis apie 0.{{7} }.5 μm. Konfokalinio taško dydį lemia mikroskopo konstrukcija, lazerio bangos ilgis, objektyvo charakteristikos, skenavimo vieneto būsenos nustatymai ir mėginio savybės. Lauko mikroskopo apšvietimo diapazonas ir gylis yra dideli, o konfokalinio mikroskopo apšvietimas yra sufokusuotas į židinio tašką židinio plokštumoje. Pagrindinis konfokalinės mikroskopijos pranašumas yra tas, kad ji gali atlikti smulkų optinį pjūvį storuose fluorescenciniuose mėginiuose (iki 50 μm ar daugiau), kurių storis yra maždaug 0,5–1,5 μm. Optinių pjūvių vaizdų seriją galima gauti perkeliant bandinį aukštyn ir žemyn, naudojant mikroskopo Z ašies žingsninį variklį. Vaizdo informacijos rinkimas yra valdomas * * plokštumoje, netrukdant signalams, skleidžiamiems iš kitų mėginio vietų. Pašalinus fono fluorescencijos įtaką ir padidinus signalo ir triukšmo santykį, konfokalinių vaizdų kontrastas ir skiriamoji geba žymiai pagerėja, palyginti su tradiciniais lauko apšvietimo fluorescenciniais vaizdais. Daugelyje egzempliorių sudėtingi konstrukciniai komponentai susipina, kad sudarytų sudėtingas sistemas, tačiau kai tik bus surinkta pakankamai optinių sekcijų, galime naudoti programinę įrangą, kad jas rekonstruotume trimis matmenimis. Šis eksperimentinis metodas buvo plačiai naudojamas biologiniuose tyrimuose, siekiant išsiaiškinti sudėtingus struktūrinius ir funkcinius ryšius tarp ląstelių ar audinių.
