Supažindinimas su pagrindiniais fazinės kontrastinės mikroskopijos principais
Fazinio kontrasto mikroskopija yra specialus mikroskopas, kuris optinio kelio skirtumą (ty fazių skirtumą), susidarantį, kai šviesa praeina pro skaidraus bandinio detales, paverčia šviesos intensyvumo skirtumu.
Kai šviesa praeina per gana skaidrų pavyzdį, nėra akivaizdžių šviesos bangos ilgio (spalvos) ir amplitudės (ryškumo) pokyčių. Todėl įprastu optiniu mikroskopu stebint nedažytus mėginius (pavyzdžiui, gyvas ląsteles), dažnai sunku atskirti jo morfologiją ir vidinę struktūrą. Tačiau dėl skirtingų ląstelės dalių lūžio rodiklio ir storio skirtumų, kai šviesa praeina pro šį pavyzdį, tiesioginės šviesos ir difrakcinės šviesos optinio kelio ilgiai skirsis. Didėjant arba mažėjant optinio kelio ilgiui, kinta greitėjančių arba atsiliekančių šviesos bangų fazė (sukuria fazių skirtumą). Šviesos fazių skirtumo negalima pajusti plika akimi, tačiau fazinio kontrasto mikroskopas gali naudoti specialų įtaisą – žiedinę diafragmą ir fazinę plokštę, kad panaudotų šviesos interferencijos reiškinį, kad šviesos fazių skirtumą paverstų amplitudės skirtumu (šviesos ir tamsus), kuriuos gali aptikti žmogaus akis. skirtumas), kad originalus skaidrus objektas aiškiai skirtųsi šviesoje ir tamsoje, o kontrastas būtų padidintas, todėl galime aiškiau stebėti gyvas ląsteles ir tarpląstelinius komponentus, kurių negalima pamatyti arba aiškiai matyti naudojant įprastą optinį mikroskopą ir tamsų lauką. mikroskopai. tam tikros mikrostruktūros.
Fazinio kontrasto mikroskopo vaizdavimo principas: šviesos šaltinis mikroskopiniam tyrimui gali praeiti tik per skaidrų žiedinės diafragmos žiedą, o po to kondensatorius jį kondensuoja į šviesos spindulį. Kai šis šviesos spindulys praeina per tikrinamą objektą, šviesa bus skirtinga dėl skirtingo kiekvienos dalies optinio kelio ilgio. deformacijos (difrakcijos) laipsnis. Kadangi vaizdas, kurį sudaro permatomas žiedas, sutampa su objektyvo lęšio galine židinio plokštuma ir konjuguota fazinės plokštės plokštuma. Todėl nenukreipta tiesioginė šviesa praeina per konjuguotą paviršių, o nukreipta išsklaidyta šviesa praeina per kompensacinį paviršių. Dėl skirtingų konjuguoto paviršiaus ir kompensacinio paviršiaus fazinėje plokštėje savybių jie atitinkamai sukels tam tikrą fazių skirtumą ir susilpnins šviesos intensyvumą, praeinantį per šias dvi dalis. Tada du šviesos rinkiniai sujungiami galinio objektyvo ir grįžta į tą patį optinį kelią. Keliaujant tiesioginė šviesa ir išsklaidyta šviesa trukdys viena kitai, pakeisdamos fazių skirtumą į amplitudės skirtumą. Tokiu būdu, atliekant fazinio kontrasto mikroskopiją, šviesa, einanti per bespalvį skaidrų kūną, paverčia žmogaus akiai neatskiriamą fazių skirtumą į amplitudės skirtumą (skirtumą tarp šviesos ir tamsos), kurį gali atskirti žmogaus akis.
