Įvadas į daugiafotonių lazerinių skenuojamųjų mikroskopų privalumus ir trūkumus
Daugiafotoninio lazerinio skenuojančio mikroskopo privalumai:
1. Sužadintas raudonos arba infraraudonosios šviesos, šviesos sklaida yra nedidelė, o mažų dalelių sklaida yra atvirkščiai proporcinga ketvirtajai bangos ilgio galiai.
2. Daugiau išsibarsčiusių fotonų iš vaizdo skerspjūvio galima surinkti be skylučių.
3. Smeigtukai negali atskirti išsklaidytų fotonų, skleidžiamų iš nesufokusuotų arba židinio sričių, o daugiafotonai turi geresnį signalo-ir-triukšmo santykį giliajame vaizde.
4. Ultravioletinę arba matomą šviesą, naudojamą vieno fotono sužadinimui, mėginys lengvai sugeria ir susilpnina, kol pluoštas pasiekia židinio plokštumą, todėl sunku sužadinti gilius sluoksnius.
5. Kalbant apie biologinį mikroskopinį stebėjimą, pirmiausia reikia nepažeisti paties organizmo aktyvios būsenos, palaikyti vandens, jonų koncentracijos, deguonies ir maistinių medžiagų cirkuliaciją. Šviesos stebėjimo srityje tiek šiluminė, tiek fotonų energija turi likti apšvitos dozės ribose ir šviesos energija, kuri nepažeidžia ląstelių.
6. Daugiafotoninė mikroskopija turi daug privalumų. Kalbant apie trijų-matmenų skiriamąją gebą, gylio invaziją, sklaidos efektyvumą, foninį apšvietimą, signalo-ir-triukšmo santykį, valdymą ir kt., yra savybių, kurių ankstesni lazeriniai mikroskopai nepasižymi arba negali pranokti
Daugiafotoninio lazerinio skenuojančio mikroskopo trūkumai:
1. Tik fluorescenciniam vaizdavimui.
2. Jei mėginyje yra chromoforų, galinčių sugerti sužadinimo šviesą, mėginys gali būti termiškai pažeistas.
3. Rezoliucija šiek tiek sumažinta, nors ją galima pagerinti vienu metu naudojant konfokalines mažas skylutes, yra signalo praradimas.
4. Dėl brangių itin greitų lazerių apribojimų daugiafotonų skenuojamųjų mikroskopų kaina yra gana didelė.
