Įvadas į pasirinkimą tarp apverstų mikroskopų ir fluorescencinių mikroskopų
Mikroskopas yra svarbus ląstelių kultūros ir susijusių darinių eksperimentų instrumentas. Šiuo metu rinkoje yra įvairių tipų mikroskopų, o išsirinkti poreikius atitinkantį ir tinkamą mikroskopą – iššūkis. Žemiau mes supažindinsime su apverstų mikroskopų ir fluorescencinių mikroskopų principais, kad būtų lengva pasirinkti.
Invertuoto mikroskopo sudėtis yra tokia pati kaip ir įprasto mikroskopo, daugiausia susidedančio iš trijų dalių: mechaninės dalies, apšvietimo dalies ir optinės dalies. Apverstojo mikroskopo sudėtis yra tokia pati kaip ir įprasto vertikaliojo mikroskopo, išskyrus tai, kad objektyvo lęšis ir apšvietimo sistema yra atvirkščiai – pirmasis yra žemiau scenos, o antrasis – virš scenos. Ši struktūra leidžia žymiai padidinti efektyvų atstumą tarp apšvietimo fokusavimo sistemos ir scenos, todėl lengviau dėti storesnius stebėjimo instrumentus, tokius kaip kultivavimo indai ir ląstelių kultūros buteliai (žinoma, stiklinės stikleliai taip pat priimtini), o darbinis atstumas tarp objektyvo ir medžiagos neturi būti labai didelis. Apverstą mikroskopą naudoja medicinos ir sveikatos įstaigos, universitetai ir tyrimų institutai mikroorganizmams, ląstelėms, bakterijoms, audinių kultūroms, suspensijoms, nuosėdoms ir tt stebėti. Jis gali nuolat stebėti ląstelių ir bakterijų dauginimosi ir dalijimosi procesą auginimo terpėje ir gali užfiksuoti bet kokią būseną šio proceso metu. Plačiai naudojamas tokiose srityse kaip citologija, parazitologija, onkologija, imunologija, genų inžinerija, pramoninė mikrobiologija, botanika ir kt.
Fluorescencinė mikroskopija naudojama medžiagų absorbcijai, transportavimui, pasiskirstymui ir lokalizacijai ląstelėse tirti. Išbandytam objektui yra du fluorescencijos generavimo būdai: spontaninė fluorescencija, kuri tiesiogiai skleidžia fluorescenciją po UV spinduliavimo; Antrinė fluorescencija atsiranda, kai stebimas objektas yra apdorojamas fluorescenciniais dažais, o po to apšvitinamas ultravioletine šviesa, kad išspindėtų fluorescencija. Kai kurios ląstelėse esančios medžiagos, pavyzdžiui, chlorofilas, veikiamos ultravioletinių spindulių, sukelia spontanišką fluorescenciją; Kai kurios medžiagos pačios negali skleisti fluorescencijos, tačiau nudažytos fluorescenciniais dažais arba fluorescenciniais antikūnais, apšvitinus ultravioletiniais spinduliais, jos taip pat gali skleisti antrinę fluorescenciją. Fluorescencinis mikroskopas naudoja labai efektyvų taškinės šviesos šaltinį, kad išspinduliuotų tam tikrą šviesos bangos ilgį (ultravioletinė šviesa 365 nm arba purpurinė mėlyna šviesa 420 nm) per spalvų filtrų sistemą kaip sužadinimo šviesą, kuri sužadina bandinio viduje esančias fluorescencines medžiagas, kad skleistų įvairias fluorescencijos spalvas, o tada stebima per okuliaro objektyvą. Tokiu būdu, net esant silpnai fluorescencijai stipriame fone, jį lengva atpažinti ir jis turi didelį jautrumą. Jis daugiausia naudojamas tiriant ląstelių struktūrą, funkciją ir cheminę sudėtį.
