Šviesaus{0}}lauko ir tamsaus-lauko vaizdavimo metodai fluorescencinėje mikroskopijoje
(1) Šviesaus lauko vaizdavimo (BFI) metodas, leidžiantis perduotam elektronų pluoštui tik paraksialinėje srityje prasiskverbti pro objektyvo apertūrą, sudarydamas tamsų vaizdą šviesiame fone. Kuo mažesnė objektyvo diafragmos diafragma, tuo didesnis šviesaus lauko vaizdo kontrastas; (2) Tamsaus lauko vaizdavimas (DFI) – tai metodas, leidžiantis tik daliai didelio kampo išsklaidyto pluošto arba tam tikram kristalo difrakcijos pluoštui praeiti pro objektyvo apertūrą, tuo pačiu blokuojant perduodamą spindulį. Taip susidaro ryškus grafinis vaizdas tamsiame fone. Šis tamsaus lauko vaizdavimo metodas gali pagerinti vaizdų kontrastą ir yra svarbi vaizdo gavimo technika.
Yra maždaug keturi būdai, kaip gauti tamsaus lauko vaizdus naudojant Leica fluorescencinius mikroskopus: (1) išlaikyti vertikalų apšvietimą išilgai optinės ašies, judant objektyvo diafragmą; (2) Įstrižinio apšvietimo naudojimas optinės ašies kryptimi išsklaidytam pluoštui užfiksuoti vadinamas centrinio tamsaus lauko vaizdavimu (CDFI); (3) objektyvo apertūra su centriniu spindulio stabdžiu ir apskritu skaidriu plotu; (4) Šviesai aptikti naudokite apskritą skaidrų kondensatorių, o objektyvo lęšiui – centrinę apskritą diafragmą. * Metodas čia yra pats paprasčiausias, tačiau jis naudoja elektroninį vaizdą distalinėje rankovių srityje, todėl aberacija yra didelė, o vaizdo kokybė nėra labai gera. Antrasis metodas gali išvengti minėtų trūkumų, tačiau Leica fluorescencinio mikroskopo objektyvo apertūra priima tik nedidelę išsklaidytų difrakuotų elektronų dalį, todėl efektyvumas yra mažesnis. Diafragmos šonas dažnai yra veikiamas didelio elektronų bombardavimo, kuris gali lengvai sukelti asimetrinį užterštumą ir paveikti vaizdo kokybę. Šiuo aspektu buvo patobulintas žiedinis objektyvo lęšis, tačiau trūkumas yra tai, kad jį sunku pagaminti ir sunku pasiekti visišką ašinę simetriją. Atsižvelgiant į santykinai sušvelnėjusius apšvietimo sistemos reikalavimus, galima naudoti pastarąjį sprendimą, kuris apima žiedinės angos pridėjimą prie kondensatoriaus, kad mėginys būtų apšviestas tuščiaviduriais spinduliais. Šio prietaiso poveikis. Jo vaizdo skiriamoji geba gali būti artima ryškių lauko vaizdų raiškai, o kontrastas labai pagerėjo.
