Kaip pasirinkti apverstą mikroskopą ir fluorescencinį mikroskopą?
Ląstelių kultūroje ir su juo susijusiuose darinių eksperimentuose mikroskopas yra labai svarbus instrumentas. Šiuo metu rinkoje yra įvairių tipų mikroskopų. Išsirinkti poreikius atitinkantį ir pritaikomą mikroskopą – iššūkis. Toliau pateikiamas įvadas į apverstų mikroskopų ir fluorescencinių mikroskopų principus, kad galėtumėte lengvai pasirinkti.
Apverstojo mikroskopo sudėtis yra tokia pati kaip ir įprasto mikroskopo, daugiausia susidedanti iš trijų dalių: mechaninės dalies, apšvietimo dalies ir optinės dalies. Apverstojo mikroskopo sudėtis yra tokia pati kaip ir įprasto vertikaliojo mikroskopo, išskyrus tai, kad objektyvo lęšis ir apšvietimo sistema yra atvirkščiai – pirmasis yra po scena, o antrasis – virš scenos. Tokia konstrukcija gali ženkliai išplėsti efektyvų atstumą tarp apšvietimo koncentravimo sistemos ir scenos, o tai patogu dėti storesnius stebimus objektus, tokius kaip kultivavimo indai ir ląstelių kultūros buteliai (žinoma, yra ir stiklinių stiklelių ir pan.) , o kartu ir atstumas tarp objektyvo lęšio ir medžiagos Darbinis atstumas tarp jų neturi būti labai didelis. Apverstieji mikroskopai naudojami mikroorganizmų, ląstelių, bakterijų, audinių kultūrų, suspensijų, nuosėdų ir kt. stebėjimui medicinos ir sveikatos padaliniuose, aukštosiose mokyklose, mokslinių tyrimų institutuose. Jis gali nuolat stebėti ląstelių, bakterijų ir kt. dauginimosi ir dalijimosi procesą auginimo terpėje ir gali fotografuoti bet kokias proceso formas. Jis plačiai naudojamas citologijos, parazitologijos, onkologijos, imunologijos, genų inžinerijos, pramoninės mikrobiologijos, botanikos ir kitose srityse.
Fluorescencinė mikroskopija naudojama tiriant medžiagų absorbciją ir transportavimą ląstelėse, cheminių medžiagų pasiskirstymą ir lokalizaciją ir kt. Apžiūrimam objektui yra du fluorescencijos generavimo būdai: autofluorescencija, kuri skleidžia fluorescenciją iš karto po apšvitinimo ultravioletiniais spinduliais. šviesa; Kai kurios ląstelėse esančios medžiagos, pavyzdžiui, chlorofilas, po ultravioletinių spindulių apšvitinimo gamina autofluorescenciją; nors kai kurios medžiagos pačios negali fluorescuoti, jos taip pat gali skleisti antrinę fluorescenciją po to, kai yra nudažytos fluorescenciniais dažais arba fluorescuojančiais antikūnais, apšvitinus ultravioletiniais spinduliais. Fluorescencinis mikroskopas naudoja taškinį šviesos šaltinį, turintį didelį šviesos efektyvumą, kad išspinduliuotų tam tikro bangos ilgio šviesą (ultravioletinė šviesa 365 nm arba purpurinė mėlyna šviesa 420 nm) per filtrų sistemą kaip sužadinimo šviesa, o sužadinus bandinyje esančias fluorescencines medžiagas, išspinduliuoja įvairių tipų fluorescenciją. spalvos, tada Stebėjimas atliekamas padidinus objektyvo objektyvą ir okuliarą. Tokiu būdu, esant stipriam kontrastiniam fonui, net jei fluorescencija yra labai silpna, ją lengva atpažinti ir jos jautrumas yra didelis. Jis daugiausia naudojamas ląstelių struktūros ir funkcijos bei cheminės sudėties tyrimams.
Fluorescenciniai mikroskopai skirstomi į perdavimo tipą ir epi-išstūmimo tipą, pirmasis yra primityvesnis, o antrasis – labiau pažengęs. Pagrindinė dviejų tipų fluorescencinių mikroskopų struktūra yra panaši, pagrindinis skirtumas yra: perdavimo tipo sužadinimo šviesa praeina per bandinį, o visas mėginys generuoja fluorescenciją, kuri tada patenka į objektyvo lęšį. Kuo didesnis padidinimas, tuo silpnesnė fluorescencija; epi-emission tipo sužadinimo šviesa projektuojama ant bandinio paviršiaus, bandinio paviršius sukuria fluorescenciją ir fluorescencija vėl patenka į objektyvo lęšį. Kuo didesnis padidinimas, tuo stipresnė fluorescencija, kuri tinka didelio padidinimo stebėjimui. Pagrindiniai fluorescencinio mikroskopo komponentai yra gyvsidabrio lempos šviesos šaltinis, sužadinimo filtro plokštė, dichroinis veidrodis (epizodo tipas), presuoto filtro plokštė ir tamsaus lauko kondensatorius (transmisijos tipas) ir kt. Be to, dėl stiprus gyvsidabrio lempų šilumos generavimas, daugumoje jų taip pat įrengti šilumą sugeriantys filtrai. Kai kurie fluorescenciniai mikroskopai taip pat turi fazinio kontrasto objektyvus ir žiedines diafragmas, todėl galimi fazės kontrasto stebėjimai. Taip pat yra fluorescencinių mikroskopų, kurie turi apverstą struktūrą, kitą apverstą mikroskopą ir pan.
Be to, minėtus mikroskopus galima surinkti į skaitmeninį mikroskopą, įdiegus CCD, kuris per skaitmeninį analoginį konvertavimą mikroskopu matomą fizinį vaizdą paverčia vaizdu kompiuteryje. Todėl mikroskopinio lauko tyrimus galime pakeisti iš tradicinio įprasto žiūrono stebėjimo į atkūrimą ekrane, taip pagerindami darbo efektyvumą.
