Mikroorganizmų tiesioginio skaičiavimo metodo eksperimentiniai etapai mikroskopu
1. Skiedimas
Tinkamai praskieskite alaus mielių suspensiją. Jei bakterinis tirpalas nėra koncentruotas, jo nereikia praskiesti.
2. Veidrodžių patikrinimo skaičiavimo kambarys
Prieš pridėdami mėginių, atlikite skaičiavimo lentos skaičiavimo kameros mikroskopinį tyrimą. Jei yra nešvarumų, jį reikia išvalyti prieš skaičiuojant.
3. Pridėkite pavyzdžių
Uždenkite švarią ir sausą kraujo ląstelių skaičiavimo plokštę dangtelio stiklu, tada naudokite sterilų smulkų lašinamą lašintuvą, kad iš dangtelio stiklo krašto numestumėte nedidelį lašelį (ne per daug) praskiesto mielių skysčio, leidžiančio bakteriniam skysčiui patekti į skaičiavimo kambarį per kapiliarinį prasmę išilgai spragos. Paprastai skaičiavimo kambarį galima užpildyti bakteriniu skysčiu. Būkite atsargūs ir negaminkite burbuliukų.
4. Mikroskopo skaičiavimas
Po 5 minučių stovėjimo, padėkite kraujo ląstelių skaičiavimo plokštelę mikroskopo stadijoje, pirmiausia naudokite mažos galios mikroskopą, kad surastumėte skaičiavimo kamerą, o tada perjunkite į didelės galios mikroskopą skaičiavimui. Jei nustatyta, kad bakterinis tirpalas prieš skaičiuojant yra per daug koncentruotas arba per daug praskiedžiamas, prieš skaičiuojant, skiedimas turėtų būti pakoreguotas. Bendras mėginio skiedimo poreikis yra apie 5-10 bakterijų ląstelės kiekvienoje mažame tinkle. Skaičiavimui pasirinkite 5 ląsteles iš kiekvieno skaičiavimo patalpos (pasirenkami 4 kampai ir centrinės ląstelės). Bakterijų ląstelės, esančios ant tinklelio linijos, paprastai yra skaičiuojamos tik viršutinėje ir dešinėje. Kai mielių daigai ir pumpurų dydis pasiekia pusę motinos ląstelės, imami du bakterijų skaičius. Skaičiuojant mėginį, reikia gauti iš dviejų skaičiavimo kamerų verčių, kad būtų galima apskaičiuoti mėginio bakterijų kiekį.
5. Išvalykite hemocitometrą
Po naudojimo nuplaukite hemocitometrą su vandens kolona ant maišytuvo. Neišplaukite sunkių daiktų. Po plovimo išdžiovinkite orą arba išdžiovinkite plaukų džiovintuvą. Mikroskopinis tyrimas, stebėkite, ar kiekvienoje mažoje ląstelėje yra likusios bakterijos ar kitos nuosėdos. Jei jis nėra švarus, jis turi būti pakartotinai plaunamas, kol jis bus švarus.
