Skirtumas tarp fluorescencinio mikroskopo ir lazerinio konfokalinio mikroskopo
fluorescencinis mikroskopas
1. Fluorescencinis mikroskopas kaip šviesos šaltinis naudoja ultravioletinę šviesą, kuri naudojama aptiktam objektui apšvitinti, kad jis skleistų fluorescenciją, o po to mikroskopu stebima objekto forma ir padėtis. Fluorescencinis mikroskopas naudojamas tirti cheminių medžiagų absorbciją, transportavimą, pasiskirstymą ir vietą ląstelėse. Kai kurios ląstelėse esančios medžiagos, pavyzdžiui, chlorofilas, gali fluorescuoti po ultravioletinių spindulių apšvitinimo; Kitos medžiagos negali fluorescuoti pačios, bet gali fluorescuoti po to, kai yra nudažytos fluorescenciniais dažais arba fluorescuojančiais antikūnais ir apšvitintos ultravioletiniais spinduliais. Fluorescencinis mikroskopas yra viena iš šių medžiagų kokybinių ir kiekybinių tyrimų priemonių.
2, fluorescencinio mikroskopo principas:
a) Šviesos šaltinis: šviesos šaltinis spinduliuoja įvairaus bangos ilgio šviesą (nuo ultravioletinių iki infraraudonųjų).
b) Sužadinimo filtro šviesos šaltinis: perduodanti tam tikro bangos ilgio šviesą, kuri gali priversti mėginį fluorescuoti, tuo pačiu blokuojant šviesą, kuri yra nenaudinga sužadinimo fluorescencijai.
c) Fluorescenciniai mėginiai: dažniausiai nudažyti fluorescenciniais pigmentais.
d) Blokuojantis filtras: blokuoja sužadinimo šviesą, kurios nesugeria bandinys, kad selektyviai perduotų fluorescenciją, o kai kurie fluorescencijos bangos ilgiai taip pat yra selektyviai perduodami. Mikroskopas, kuris kaip šviesos šaltinį naudoja ultravioletinę šviesą, kad apšvitintas objektas skleistų fluorescenciją. Elektroninį mikroskopą pirmą kartą surinko Knohl ir Ha Roska Berlyne 1931 m. Šiame mikroskope vietoj šviesos pluošto naudojamas didelės spartos elektronų pluoštas. Kadangi elektronų srauto bangos ilgis yra daug trumpesnis nei šviesos bangos, elektroninio mikroskopo padidinimas gali siekti 800 tūkst. kartų, o minimali skiriamoji geba yra 0,2 nanometro. Skenuojantis elektroninis mikroskopas, pradėtas naudoti 1963 m., gali priversti žmones pamatyti mažas struktūras objektų paviršiuje.
3. Taikymo sritis: naudojama mažyčių objektų vaizdui padidinti. Paprastai jis taikomas biologijos, medicinos ir mikroskopinių dalelių stebėjimui.
Konfokalinis mikroskopas
1. Konfokalinis mikroskopas atspindinčios šviesos optiniame kelyje prideda pusiau atspindintį pusiau lęšį, kuris per lęšį pralėkusią atspindėtą šviesą laužia kitomis kryptimis. Jo židinyje yra pertvara su skylute, o skylutė yra židinyje. Už pertvaros yra fotodaugiklio vamzdis. Galima įsivaizduoti, kad atspindėta šviesa prieš ir po aptikimo šviesos židinio praeina per šią konfokalinę sistemą ir nebus sufokusuota į mažą skylutę, o bus užblokuota pertvaros. Taigi fotometras matuoja atspindėtos šviesos intensyvumą židinyje.
2. Principas: tradiciniame optiniame mikroskope naudojamas lauko šviesos šaltinis, o kiekvieno bandinio taško vaizdą trikdys gretimų taškų difrakcija arba išsklaidyta šviesa; Lazerinis skenuojantis konfokalinis mikroskopas nuskaito kiekvieną bandinio židinio plokštumos tašką naudodamas taškinį šviesos šaltinį, kurį sudaro lazerio spindulys, einantis pro apšvietimo angą. Apšvitintas bandinio taškas vaizduojamas aptikimo skylutėje, kurią taškas po taško arba eilutę po taško priima fotodaugintuvo vamzdelis (PMT) arba šaltai sujungtas įtaisas (cCCD), aptikus skylutę, ir greitai susidaro fluorescencinis vaizdas. kompiuterio monitoriaus ekrane. Apšvietimo skylutė ir aptikimo skylutė yra susietos objektyvo lęšio židinio plokštumos atžvilgiu, o židinio plokštumos taškai tuo pačiu metu fokusuojasi į apšvietimo smeigtuko skylutę ir spinduliavimo skylę, o taškai, esantys už židinio plokštumos, nebus turi būti vaizduojamas aptikimo angoje, kad gautas konfokalinis vaizdas būtų optinis bandinio skerspjūvis, kuris pašalintų bendro mikroskopo neryškaus vaizdo defektą.
3. Taikymo sritys: medicina, gyvūnų ir augalų tyrimai, biochemija, bakteriologija, ląstelių biologija, audiniai ir embrionai, maisto mokslas, genetika, farmakologija, fiziologija, optika, patologija, botanika, neuromokslai, jūrų biologija, medžiagų mokslas, elektronikos mokslas, mechanika, naftos geologija ir mineralogija.
