Konfokalinės mikroskopijos ir įprastinės optinės mikroskopijos palyginimas
Mikroskopas yra pagrindinis ląstelių stebėjimo įrankis. Pagal skirtingus šviesos šaltinius jį galima suskirstyti į dvi kategorijas: optinius mikroskopus ir elektroninius mikroskopus. Pirmasis naudoja matomą šviesą (ultravioletinis mikroskopas naudoja ultravioletinę šviesą) kaip šviesos šaltinį, o antrasis - elektronų pluoštą kaip šviesos šaltinį. Tiek įprasti optiniai mikroskopai, tiek lazeriniai konfokaliniai mikroskopai priklauso optiniams mikroskopams.
Paprastas optinis mikroskopas
Bendras biologinis mikroskopas susideda iš trijų dalių, būtent: ① apšvietimo sistemos, įskaitant šviesos šaltinį ir kondensatorių; ② Optinio stiprinimo sistema, susidedanti iš objektyvo ir okuliaro, yra pagrindinis mikroskopo korpusas. Siekiant pašalinti sferinę ir chromatinę aberaciją, tiek okuliaras, tiek objektyvas yra sudaryti iš sudėtingų lęšių grupių Mechaninis įtaisas, naudojamas medžiagoms pritvirtinti ir stebėjimui palengvinti.
Mikroskopo vaizdo aiškumas priklauso ne tik nuo jo padidinimo, bet ir nuo skiriamosios gebos. Rezoliucija reiškia mikroskopo (arba žmogaus akies, esančios 25 cm atstumu nuo taikinio) gebėjimą atskirti objektus mažais intervalais. Skiriamoji geba priklauso nuo šviesos bangos ilgio, diafragmos rodiklio ir terpės lūžio rodiklio. Jis išreiškiamas kaip: R=0.61 λ/NANA=nsin /2, kur n=terpės lūžio rodiklis; =diafragmos kampas (kampas, kuriuo bandinys atveria objektyvo lęšio diafragmą), NA=skaitinė diafragma. Ar veidrodžio kampas visada yra mažesnis nei 180?, Taigi didžiausia sina/2 zui reikšmė turi būti mažesnė nei 1.
Optinių lęšių gamyboje naudojamo stiklo lūžio rodiklis yra 1.65-1.78, ir kuo naudojamos terpės lūžio rodiklis artimesnis stiklo, tuo geriau. Sausų objektyvų lęšiams terpė yra oras, o diafragmos santykis paprastai yra 0.05-0.95; Alyvos lęšyje kaip terpė naudojamas kedro aliejus, o diafragmos santykis gali būti artimas 1,5.
Įprastos šviesos bangos ilgis yra {{0}}nm, todėl mikroskopo skiriamoji geba bus ne mažesnė nei 0,2 μm, o žmogaus akies skiriamoji geba yra 0,2 mm. Todėl didžiausias mikroskopo dizaino padidinimas paprastai yra 1000X.
