Audinių blokų tūrio biologinė mikroskopija
Biomikroskopija Iki šiol fiksavimas ant ledo, šaldyti itin ploni pjūviai ir šaldytas sausas manipuliavimas yra įprasti audinių ir ląstelių rentgeno mikrolaukų metodai. Išsami informacija apie metodą paaiškinta šiuose punktuose:
Biologiniai mikroskopai Mikroskopai su kondensatoriaus lęšiu gali būti judinami aukštyn ir žemyn, kad būtų pasiektas vidutinis ryškumas, arba galima pakeisti kintamo šviesos plėtiklio diafragmą, kad būtų pasiektas vidutinis 9b ryškumas. Jei šviesa saulėta, aptikimo sritį galima atitinkamai pakelti ir kintamos šviesos diafragmą atitinkamai padidinti. Jei šviesa per stipri, prožektorių veidrodį galima pritaikyti žemyn, kintamos šviesos diafragmą atitinkamai sumažinti. Jei tokiu atveju vis tiek jaučiatės apakinti, galite pasirinkti tinkamą filtrą, įdėtą į laikiklį po prožektoriumi. Tai galima gauti, kad būtumėte patenkinti ryškumu. Žinoma, reguliuojant viršutinę ir apatinę kondensatoriaus lęšio padėtis gali keistis šviesos skaitymo diafragmos dydis ir tinkamų filtrų pasirinkimas, tai yra po tam tikro praktikos ir patirties.
Biologinis mikroskopas Labai svarbus klausimas yra mėginių ėmimo ir ląstelių atskyrimo, džiovinimo šalčiu ir dervos įterpimo (FD) procese po ultra bukletų užšaldymo, džiovinimo šalčiu po kiekvienos 65 elementinės sudėties dalies dalies smulkaus apdorojimo. tvarkomi labai atsargiai ir neturi pažeisti ląstelių, kurias reikia stebėti ir analizuoti. Kadangi rentgeno mikrozono analizė yra ne tik daug žingsnių, o kaina yra labai didelė, jei po ilgo ir kelių apdorojimo etapų analizuojamos ląstelės yra pažeistos arba negyvos ląstelės, daryti klaidingas išvadas. yra labai apgailėtina. Pavyzdžiui, kolagenazės būdu išskirti kardiomiocitai turi dvi morfologijas: viena yra ilgos lazdelės formos, o kita – apvali. Pastarosios yra mirštančios ląstelės, kurios buvo pažeistos ląstelių išskyrimo metu.
Biomikroskopija Elektrolitų kiekis ir pasiskirstymas šių dviejų tipų ląstelėse labai skiriasi. Na buvo labai didelis ir K labai mažas apvaliuose kardiomiocituose, o ca koncentracija buvo labai didelė mitochondrijose. Patikrinus kitais analitiniais metodais, buvo įrodyta, kad didelis Na ir mažas K kiekis apvaliose ląstelėse ir didelis ca mitochondrijose atsirado dėl ląstelės membranos pažeidimo ląstelių atskyrimo metu. Ląstelių ir audinių šalta fiksacija dažnai atliekama naudojant gesinimo fiksaciją, o po to konservavimą skystame azotu. Užkonservavimo veiksmingumui svarbi gesinimo fiksacija. Gyvose ląstelėse arba šviežiuose audiniuose gausu vandens, kai gesinimas dažnai yra ląstelės ar audiniai, o šalčio agentas (ypač skystu azotu grynai šaltas) tiesiogiai kontaktuoja su pirmosios užšaldymo fiksacijos dalimis, taip suformuodamas „apvalkalą“, kuris neleidžia šaltai fiksuoti ląstelės centro. Dėl to, atliekant rentgeno mikroląstelinę analizę, ledo kristalai dažnai randami didesnių ląstelių centre. Kad taip neatsitiktų, kaip aušinimo medžiagos naudojamos medžiagos, kurių lydymosi temperatūra aukštesnė nei skystojo azoto, bet žemesnė nei 806c sauso. Tokių medžiagų yra daug, bet * lengva gauti, nebrangus yra koncentruotas propanas (virimo temperatūra 42,120 c, lydymosi temperatūra 187,10 c, molekulinė masė 44,1), aušinimo greitis * greitas. Tačiau jis turi trūkumą, kad yra degus.
Biologinis mikroskopas gali būti dedamas ant specialios lentynos raumenų skaidulos, kad reikia fiksuoti raumenų skaidulų susitraukimą, kad pasiektų tam tikrą laiko fazę, nedelsiant paleisti antgalį, kad skystas propanas patektų į raumenų skaidulų srovę, kad būtų užgesintas šaltis sutvarkė. Tada raumenų skaidula išimama kartu su stelažu ir supilama į skystą azotą. Jei fiksuojate kraujo ląsteles arba izoliuotas ląsteles, pirmiausia centrifuguokite mažu greičiu, kad ląstelės būtų koncentruotos, ląstelės bus perkeltos į gerą šilumos laidumą iš sidabrinio vamzdelio, vamzdelis į skystą propano karkasą šaltai fiksuotas. Hall laboratorijoje fiksuota žiurkės kasa, pirmieji du plieno gabalai su skystu heliu (arba skystu azotu) iš anksto aušinami, su spaustuku, du vario gabalai bus dedami prieš ir už kasos, kad teta liaukos gesinimo šalta fiksacija. Audiniai ar ląstelės ilgą laiką gali būti laikomi skystame azote po gesinimo ir fiksavimo.
